[发明专利]一种基于银‑氨基化石墨烯‑二硫化钼构建的生物传感器的制备方法及应用

权利要求书

1.一种基于银-氨基化石墨烯-二硫化钼构建的生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤如下：

（1）依次用1.0、0.3、0.05μm的氧化铝粉末对玻碳电极进行抛光，分别在超纯水和乙醇中超声清洗，氮气吹干；

（2）在电极表面滴加6μL浓度为1~2mg/mL的银-氨基化石墨烯-二硫化钼水溶液，干燥；

（3）继续将6μL浓度为5~20μg/mL的癌胚抗原抗体溶液滴加到修饰电极表面，于4℃冰箱中孵化1h，清洗干净；

（4）用3μL浓度为5~20mg/mL的牛血清白蛋白溶液封闭非特异性活性位点，于4℃冰箱中孵化1h，清洗干净；

（5）将6μL浓度为0.0002~20ng/mL的一系列不同浓度的癌胚抗原用于和抗体的特异性识别，室温下孵化1h，清洗干净，于4℃冰箱中储存备用。

2.如权利要求1所述的一种基于银-氨基化石墨烯-二硫化钼构建的生物传感器的制备方法，所述银-氨基化石墨烯-二硫化钼的制备，其特征在于，步骤如下：

在10mL无水乙醇中分散0.1~0.3g氧化石墨烯，超声5h，加入0.2~0.4mL3-氨丙基三乙氧基硅烷，70℃回流1.5h，加入0.1~0.3mL、质量分数为80%的水合肼，95℃回流1.5h，离心洗涤，35℃真空干燥，制得氨基化石墨烯；

将8~12mg氨基化石墨烯加入到16~25mL银纳米粒子溶液中，震荡12h，离心洗涤，35℃真空干燥，制得银-氨基化石墨烯；

将40mg硫磺粉和20~40mg银-氨基化石墨烯混合后，加入到含有15mL辛胺和15mL乙醇的溶液中，超声分散后，加入90mg钼酸铵，进一步超声后，将混合溶液转入反应釜中，在200℃下反应12h，离心洗涤后真空干燥，得到银-氨基化石墨烯-二硫化钼。

3.如权利要求1所述的制备方法制备的一种基于银-氨基化石墨烯-二硫化钼构建的生物传感器对癌胚抗原的检测方法，其特征在于，步骤如下：

（1）使用电化学工作站以三电极体系进行测试，饱和甘汞电极为参比电极，铂丝电极为辅助电极，所制备的传感器为工作电极，在10mL的pH值为6.8的磷酸盐缓冲溶液中进行测试；

（2）选择计时电流法对癌胚抗原进行检测，将输入电压设置为-0.4V，取样间隔设置为0.1s，运行时间设置为400s；

（3）当背景电流趋于稳定后，每隔50s向磷酸盐缓冲溶液中注入10μL浓度为5mol/L的双氧水溶液，然后记录电流随时间的变化，绘制工作曲线；

（4）将待测样品溶液代替癌胚抗原标准溶液进行检测。