[发明专利]一种准确度高、抗干扰能力强的总胆固醇检测试剂有效
申请号: | 201510988460.4 | 申请日: | 2015-12-24 |
公开(公告)号: | CN105385751B | 公开(公告)日: | 2019-10-15 |
发明(设计)人: | 李静;高雪萍;谭柏清 | 申请(专利权)人: | 山东博科生物产业有限公司 |
主分类号: | C12Q1/60 | 分类号: | C12Q1/60;C12Q1/44;C12Q1/28;C12Q1/26 |
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地址: | 250200 山东省济南市*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 准确度 抗干扰 能力强 胆固醇 检测 试剂 | ||
本发明一种准确度高、抗干扰能力强的总胆固醇检测试剂,涉及总胆固醇检测技术领域,本发明在试剂R使用了生物缓冲液CAPS(3-(环己氨基)-1-丙磺酸)缓冲液,保证缓冲能力;在试剂的R中加入十八烷基三甲基溴化铵和EMULGEN‑707两种表面活性剂,较好的提高试剂的乳化作用,提高试剂的准确度和特异性;在试剂R中加入了海藻糖、甘露醇等稳定剂,能够有效地改善试剂的稳定性;在试剂R中加入了羟基乙叉二膦酸,能够有效的螯合重金属离子,提高试剂的准确性;本发明还在试剂中加入了抗化学酸氧化酶和胆红素氧化酶,能够有效的去除抗坏血酸和胆红素的干扰,产品配置简单,价格低廉,非常适合大面积的临床推广。
技术领域
本发明涉及总胆固醇检测技术领域,特别涉及一种准确度高、抗干扰能力强的总胆固醇检测试剂。
背景技术
总胆固醇是指血液中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。人群总胆固醇水平主要取决于遗传因素和生活方式。总胆固醇包括游离胆固醇和胆固醇酯,肝脏是合成和贮存的主要器官。胆固醇是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及维生素D等生理活性物质的重要原料,也是构成细胞膜的主要成分,胆固醇(CHO)和胆固醇酯(ChE)为类脂质,是脂肪在血液中存在的一种形式。胆固醇在体内有许多重要功能,其主要功能有:胆固醇是所有细胞膜和亚细胞器膜上的重要组成成分;是胆汁酸的唯一前体;是所有类固醇激素,包括性腺和肾上腺激素的前体等。人体血清胆固醇增多常见于高脂血症、动脉粥样硬化、糖尿病、肾病综合征、甲状腺功能减退、胆总管阻塞、高血压(部分)等疾病。胆固醇含量减少常见于低脂蛋白血症、贫血、败血症、甲状腺功能亢进、肝病、严重感染、营养不良、肺结核和晚期癌症等疾病。胆固醇作为血脂类常规检查项目,在临床中有着很重要的应用。因此,研发一种准确度高、抗干扰能力强的总胆固醇检测试剂是很有必要的。
测定总胆固醇的方法有多种,常规方法包括化学法和酶法。化学法需要有机溶剂提取胆固醇,涉及强酸反应,特异性差,干扰因素多,准确度差,操作步骤复杂,不适用于临床操作。因此,临床一般采用酶法。酶法的原理是血清中的胆固醇被胆固醇脂水解酶(CHE)水解为游离胆固醇,后者被胆固醇氧化酶(CHO)氧化成胆甾烯酮和过氧化氢,再经过过氧化物酶(POD)催化4-氨基安替比林与酚生成红色醌亚胺色素,它的颜色深浅与胆固醇的浓度成正比。该方法具有较好的精度和准确性,灵敏度高,但是易受多种干扰因素的干扰,例如血清中的物质如血红蛋白,胆红素,抗坏血酸等也会干扰测定结果,因此,在酶法的基础上发明了一种准确度好,抗干扰能力更强的总胆固醇检测试剂。
发明内容
本发明的目的是提供一种一种准确度高、抗干扰能力强的总胆固醇检测试剂。
本发明基本原理:
血清中的胆固醇被胆固醇脂水解酶(CHE)水解为游离胆固醇,后者被胆固醇氧化酶(CHO)氧化成胆甾烯酮和过氧化氢,再经过过氧化物酶(POD)催化4-氨基安替比林与酚生成红色醌亚胺色素,醌亚胺的最大吸收峰在505nm附近,吸光度与样本中的总胆固醇含量成正比。
本发明是通过以下步骤得到的:
一种准确度高、抗干扰能力强的总胆固醇检测试剂,包括试剂R,所述试剂R的组成如下:
试剂R中含有:
CAPS缓冲液(pH7.0) 50mmol/L
4-氨基安替比林 1.0mmo1/L
胆固醇酯酶(CHE) 2000U/L
胆固醇氧化酶(CHO) 2000U/L
过氧化物酶(POD) 2500U/L
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