[发明专利]一株高产葡萄糖氧化酶的黑曲霉及其应用

说明书

本发明公开了一株高产葡萄糖氧化酶的黑曲霉菌株，其为黑曲霉(Aspergillus niger)BLCC6‑0009，已于2015年12月04日保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO:M 2015722。本发明还公开了一种葡萄糖氧化酶的生产方法，在发酵培养基中发酵权利要求1所述的黑曲霉BLCC6‑0009，即得到葡萄糖氧化酶发酵液。本发明筛选得到的黑曲霉菌株，具有葡萄糖氧化酶产量高的优势，可用于制备饲料酶制剂。

技术领域

本发明涉及一株高产葡萄糖氧化酶的黑曲霉及其应用，属于微生物发酵工业技术领域。

背景技术

葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase，简称GOD)能够与过氧化氢酶(HPD)组成氧化还原酶体系。葡萄糖氧化酶在分子氧存在的条件下能氧化β-D-葡萄糖生成葡萄糖酸和过氧化氢。葡萄糖氧化酶广泛地分布于动物、植物和微生物体内，微生物具有生长繁殖速度快，来源广泛等特点使之成为葡萄糖氧化酶的主要来源。另外，葡萄糖氧化酶作为国家允许使用的饲料酶制剂之一，还是一种新型的酶制剂。葡萄糖氧化酶在氧分子存在下能氧化葡萄糖生成葡萄糖酸和过氧化氢。因此，葡萄糖氧化酶通过在肠道中的产酸和耗氧可能起到酸化剂和益生菌的作用。

葡萄糖氧化酶在食品工业、医药、畜禽养殖业及生物领域存在着巨大的应用潜力，但一直以来我国纯化生产的酶制剂纯度较低，活力较差，葡萄糖氧化酶几乎全部依赖于进口，生产成本也随之提高。因此，筛选产葡萄糖氧化酶酶活较高的菌株，具有重大的实际应用价值。

发明内容

针对上述现有技术，本发明的目的是提供一株高产葡萄糖氧化酶的黑曲霉及其应用。

为实现上述目的，本发明采用下述技术方案：

一株高产葡萄糖氧化酶的黑曲霉菌株，其为黑曲霉(Aspergillus niger)BLCC6-0009，已于2015年12月04日保藏于中国武汉市武汉大学的中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，其保藏编号为CCTCC NO:M 2015722。

该菌株的形态学特征为：菌丝为白色，产孢后表面黑色，粉末状。分生孢子头的顶囊呈黑色，球形或近球形，小梗双层，第一层粗大，第二层短小，呈放射状排列，布满整个顶囊。

上述黑曲霉(Aspergillus niger)BLCC6-0009在产葡萄糖氧化酶发酵生产中的应用也是本发明保护的范围。

本发明的另一目的是提供一种菌剂，其活性成分为上述黑曲霉(Aspergillusniger)BLCC6-0009或其发酵产物。

上述黑曲霉(Aspergillus niger)BLCC6-0009和/或菌剂在制备饲料酶制剂中的应用也是本发明的保护范围。

本发明还提供一种葡萄糖氧化酶的生产方法，在发酵培养基中发酵上述黑曲霉(Aspergillus niger)BLCC6-0009，即得到葡萄糖氧化酶发酵液。

所述发酵培养基的组成为：葡萄糖10％、蛋白胨0.1％、磷酸二氢钾0.4％、硝酸钠0.4％、硫酸镁0.07％、氯化钾0.05％、碳酸钙0.07％，均为质量百分比，pH自然。

上述方法中，发酵的温度为25-35℃(优选为30℃)，发酵的时间为96-120h。上述方法中，黑曲霉(Aspergillus niger)BLCC6-0009的接种量为3-5％，优选为4％(体积分数)。

上述方法中，在所述发酵前，还包括如下步骤：

将黑曲霉(Aspergillus niger)BLCC6-0009的斜面种子接种在灭菌后的种子培养基中，在25-35℃(优选为30℃)、180r/min培养2d，得到液体种子液。

所述种子培养基的组成为：