[发明专利]一种多遗传终点生物组试验评价净水厂生产废水回用遗传毒性的方法

权利要求书

1.一种多遗传终点生物组试验评价净水厂生产废水回用遗传毒 性的方法，其特征在于所述方法以净水厂建有生产废水回用单元的出 厂水为研究对象，以生物组遗传毒性试验：Ames试验、体内微核小 鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、仓鼠卵巢细胞微 核试验、SOS/umu试验为评价标准，当生物组遗传毒性试验中有3个 阳性结果即表示存在生物遗传毒性安全性。

2.根据权利要求1所述的多遗传终点生物组试验评价净水厂生 产废水回用遗传毒性的方法，其特征在于所述生物组遗传毒性试验进 行之前，须对研究对象进行预处理，其中，Ames试验、体内微核小 鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验以及小鼠精子畸形试验采用同一预处 理模式，仓鼠卵巢细胞微核试验和SOS/umu试验采用同一预处理模 式。

3.根据权利要求2所述的多遗传终点生物组试验评价净水厂生 产废水回用遗传毒性的方法，其特征在于所Ames试验、体内微核小 鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验以及小鼠精子畸形试验的预处理模式 采用固相萃取法，以XAD-2型树脂为吸附树脂，具体步骤如下：

(1)使用前将树脂用重蒸甲醇、丙酮各提取8h，装入磨口瓶中 以重蒸甲醇浸泡备用；

(2)将树脂湿法装入的玻璃吸附柱中至树脂床 高110mm，并在吸附柱底部和树脂床上铺经甲醇和丙酮提取过得玻璃 丝，然后放出甲醇，至甲醇恰好达树脂床顶部为止；

(3)用1000～1200ml蒸馏水分5～6次冲洗树脂柱，冲洗净残 存甲醇后，保留树脂柱被蒸馏水覆盖，以防进气；

(4)吸附柱上端通过医用滴管与盛水容器相连，利用虹吸作用 通过调节螺旋夹控制水样流经树脂床的流速为50～70mL/min，过柱 水的总体积为250L；

(5)过柱完毕，用60～80ml重蒸的乙醚洗脱；

(6)洗脱液收集到烧杯中并加入烘干的无水硫酸钠进行脱水处 理，最后用转移到KD浓缩器于43℃水浴的条件下浓缩至1ml以下， 4℃冰箱保存备用。

4.根据权利要求3所述的多遗传终点生物组试验评价净水厂生 产废水回用遗传毒性的方法，其特征在于所述XAD-2型树脂的颗粒 度40～60目。

5.根据权利要求3所述的多遗传终点生物组试验评价净水厂生 产废水回用遗传毒性的方法，其特征在于所述步骤(5)中，首次洗 脱使乙醚在柱子中存留30～40min。

6.根据权利要求2所述的多遗传终点生物组试验评价净水厂生 产废水回用遗传毒性的方法，其特征在于所述仓鼠卵巢细胞微核试验 和SOS/umu试验的预处理模式如下：

(1)采集水样时，采样瓶内用待测水样润洗3次，每种水样采 集10L；

(2)所有水样使用直径为142mm的Millipore微滤系统和孔径 0.7μm的APFF玻璃纤维滤膜过滤后再经活化后的HLB柱富集；

(3)将水样通过样品管连接至活化好的HLB柱，每根HLB柱 富集水样2升，富集完毕并抽干水后，以10mL二氯甲烷为淋洗剂分 三次进行洗脱，旋蒸浓缩后，添加经脱水的无水硫酸钠，用氮气吹干 后置换0.2mL生物实验溶剂DMSO于-20℃冰箱保存用于遗传毒性生 物测试。

7.根据权利要求6所述的多遗传终点生物组试验评价净水厂生 产废水回用遗传毒性的方法，其特征在于所述步骤(2)中，HLB柱 采用二氯甲烷和甲醇活化柱子。

8.根据权利要求6所述的多遗传终点生物组试验评价净水厂生 产废水回用遗传毒性的方法，其特征在于所述步骤(3)中，以10mL 二氯甲烷为淋洗剂分三次进行洗脱时，第一次4mL、第二次3mL和 第三次3mL。