[发明专利]牛樟树组织培养快速繁殖的方法在审
| 申请号： | 201510990381.7 | 申请日： | 2015-12-25 |
| 公开（公告）号： | CN105409779A | 公开（公告）日： | 2016-03-23 |
| 发明（设计）人： | 王磊;王仲礼;宿红艳 | 申请（专利权）人： | 鲁东大学 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 南通市永通专利事务所 32100 | 代理人： | 葛雷 |
| 地址： | 264025 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 樟树 组织培养 快速 繁殖 方法 | ||
1.一种牛樟树组织培养快速繁殖的方法，其特征是：包括下列步骤：
(1)外植体的采集和消毒：
取带腋芽的茎段作为外植体，用质量百分数0.05％的洗洁精浸泡5min，自来水冲洗后，移置于超净工作台上；在75％乙醇中浸泡30秒，无菌水冲洗2遍后，用0.1％升汞消毒10min，无菌水清洗3次后，再用无菌吸收纸去掉表面水分，切成0.8-1cm带一个腋芽的茎段；
(2)无菌试管苗的获得：
将上述消毒过的外植体接种于芽分化培养基上30天诱导不定芽萌发，得到无菌试管苗；培养温度为26-28℃，光照强度为1500lux，光照周期：光/暗为12h/12h；分化培养基以WPM为基本培养基，添加植物激素包括：6-苄基腺嘌呤2.0mg/L、吲哚丁酸0.1mg/L、激动素0.2mg/L，蔗糖和琼脂浓度分别是20g/L和6.5g/L；培养基pH值为5.8；
(3)试管苗繁殖培养：
将步骤(2)得到的无菌试管苗置于增殖培养基上得到大量不定芽；培养温度为26-28℃，光照强度为1500lux，光照周期：光/暗为12h/12h；增殖培养基是以WPM为基本培养基，添加聚乙烯吡咯烷酮500mg/L、活性炭1g/L以及植物激素6-苄基腺嘌呤2.5mg/L、吲哚丁酸0.3mg/L、灵发素0.1mg/L，蔗糖和琼脂浓度分别是20g/L和6.5g/L；培养基pH值为5.8；
(4)试管苗的生根培养：
将步骤(3)得到的不定芽，置于生根培养基中诱导生根；培养温度为26-28℃，光照强度为1500lux，光照周期：光/暗为12h/12h；增殖培养基是以WPM为基本培养基，添加聚乙烯吡咯烷酮0.5g/L、活性炭1.0g/L以及植物激素：吲哚丁酸0.5-1.0mg/L、萘乙酸0.5mg/L、灵发素0.1mg/L；蔗糖和琼脂浓度分别是20g/L和6.5g/L；培养基pH值为5.8；
(5)炼苗移栽：
将步骤(4)获得的带根的3cm高试管苗炼苗5-7d，用镊子取出试管苗，洗净根部的培养基，移栽置灭菌后的质量比：蛭石:泥炭土为1:1的基质中生长2个月后，再移栽大棚进行管理。
2.根据权利要求1所述的牛樟树组织培养快速繁殖的方法，其特征是：所述WPM为木本植物用培养基，
配方：
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