[发明专利]寡雄腐霉发酵菌质在抗肿瘤方面的应用

说明书

技术领域

本发明涉及医学技术领域，具体是一种寡雄腐霉发酵菌质在抗肿瘤方面的应 用。

背景技术

目前，在抗肿瘤研究中，诱导癌细胞的凋亡是一个重要的途径，促进肿瘤细 胞凋亡可达到肿瘤缩小，癌症消退的目的，如传统的抗肿瘤药物顺铂、美法仑等 均能刺激细胞线粒体凋亡途径，引发凋亡。此种方式比采用杀伤肿瘤细胞的治疗 方式有明显的优越性，因为抗肿瘤药物若能大量的诱发肿瘤细胞的凋亡，激活其 自身的程序性死亡过程，将会避免因大量细胞坏死而释放细胞内物质引起的各种 副作用，减轻化疗对正常细胞的损伤，延长患者的生存期。然而，至今尚未筛选 出能诱发肿瘤细胞大量凋亡的抗肿瘤药。

寡雄腐霉PythiumolgiandurmDreehsler是藻物界(Chromista)卵菌纲 (Oomycetes)霜霉目(Peronosporates)腐霉科(Pythiaceae)腐霉属(pythium) 中的一种寄生为主兼性腐生真菌，在自然界中广泛分布。寡雄腐霉不伤害作物组 织，但是经常从植物根部表面分离获得(Mohamedetal.,2007)。迄今为止,未 见寡雄腐霉引起作物病害的报道，而且已经确认对6科12种重要农作物无致病 作用(Brozova，etal.,2002)。寡雄腐霉能有效防治真菌性病害，它能拮抗或寄 生16个属中的20多种真菌和其他卵菌(楼兵干等,2005)。所以在农业上作为 生防菌广泛应用。但是有关肿瘤抑制的研究还没有报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种高效低毒的寡雄腐霉发酵菌质在抗肿瘤方面的 应用。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

寡雄腐霉发酵菌质在抗肿瘤方面的应用，所述的寡雄腐霉发酵菌质的制备， 包括以下步骤：

(1)寡雄腐霉菌种的分离保存

采集含有寡雄腐霉菌种的土壤，4℃保存备用；取0.1～1mg土粒置于9cm 的培养皿中，再缓慢倾入腐霉选择培养基，25℃暗培养，待长出菌落后挑取边缘 菌丝转移新的腐霉选择培养基上，进行纯化并保存菌种；

(2)寡雄腐霉发酵菌质的制备

用灭菌打孔器打取活化的带培养基的寡雄腐霉菌块，将其放入装有PDA液 体培养的三角瓶中，25℃、130r/min下培养至菌团球长满三角瓶，即得寡雄腐 霉发酵菌质。

作为本发明进一步的方案：所述步骤(2)中，还包括将寡雄腐霉发酵菌质 浓缩成浸膏，4℃冰箱中备用。

作为本发明进一步的方案：所述的肿瘤为H₂₂荷瘤。

作为本发明进一步的方案：所述的寡雄腐霉发酵菌质的干物质用量为750～ 1000mg/kg。

作为本发明进一步的方案：所述的寡雄腐霉发酵菌质的干物质用量为 750mg/kg。

作为本发明进一步的方案：所述的寡雄腐霉发酵菌质的干物质用量为 1000mg/kg。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

本发明通过科学实验发现了一种具有抗肿瘤作用的寡雄腐霉发酵菌质，其具 有抗肿瘤活性，尤其是特定浓度的寡雄腐霉发酵菌质具有明显引起肿瘤细胞凋亡 的作用。本发明为科学廉价地寻找高效低毒的诱导肿瘤细胞凋亡的药物开辟了新 的思路，极具科研意义。

附图说明

图1是寡雄腐霉的形态特征图；其中A、B：孢子囊；C：藏卵器；D：蠕虫 形雄器侧面与藏卵器接触；E：亚球状雄器异丝生雄器顶端与藏卵器接触；F： 卵孢子充满藏卵器；

图2是药物高剂量组小鼠的肿瘤切片图；

图3是药物中剂量组小鼠的肿瘤切片图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地 描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。 基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获 得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明实施例中，寡雄腐霉发酵菌质在抗肿瘤方面的应用，从以下几个方面 进行研究：

一、寡雄腐霉发酵菌质的制备：

菌种：寡雄腐霉

来源：内蒙古通辽市罕山国家自然保护区土壤

1.寡雄腐霉菌种的分离保存

1.1寡雄腐霉菌种的保存