[发明专利]一种濒危孑遗树种水松种子组培苗瓶外生根培养方法

说明书

技术领域

本发明属于濒危树种植物组织培养繁殖技术领域，具体涉及一种濒危树种水松组织培养技术，尤其涉及一种水松种子组培苗瓶外生根培育方法。

背景技术

水松Glyptostrobus pensilis Staunt.Koch，又名水莲、水帝松、水杉松、水枞、水极、长柏等，水松为杉科(Taxodiaceae)水松属落叶或半落叶乔木，是仅零星分布于我国广东、广西、福建、江西、云南等南方省区和越南北部的单种属植物。水松始生于1亿多年前的中生代，号称“植物活化石”，是与恐龙同时代的原始古生物，1999年国务院公布《国家重点保护野生植物名录》中被列为我国一级保护植物。水松在中生代时曾广泛分布于北半球，至晚第三纪，特别是第四纪冰川期以后，气温下降，水松的分布区剧烈收缩南移，最后在北美和欧洲均灭绝，仅在受冰期影响较小的我国长江流域以南部分地区及越南保存下来，成为孑遗树种。因此，水松对研究杉科植物系统发育、古植物学和第四纪冰川气候等方面都有重要的科学价值，对物种的形成与演化，物种资源的保护均有重大的科学意义。

水松树形优美，树干粗壮挺直。枝叶疏密适度，可做庭园观赏树和风景林。其根系发达，由于可以产生屈膝状呼吸根，因此可以直接生长于水边或沼泽地，是防风固堤和农田防护的优良树种。水松的材质轻软，能耐水湿，耐腐力强，除做建筑用材外，还可用于造船、涵洞和木闸板。球果及树皮含单宁，可提取拷胶，用于浸染渔网。根部木质更轻，浮力大，被广泛用于加工救生圈和软木塞。水松树皮、叶和果实均可入药，可以治疗风湿性关节炎和皮炎等疾病。

水松对生境的依赖程度很高，繁殖更新能力不强，自然条件下，种子多数是掉落在水中，被水浸坏，不能萌发；幼苗不能长期生长在水中，怕霜冻；成年树易受冻害，不耐污浊的空气，尤忌含硫的气体；球果易受虫害，严重影响结实率。种种因素导致水松的自然更新困难，加之人们对水松的过度砍伐开发，致使现在只保留了极少量的天然林群落，大部分地区的水松为栽培群落，而且个体数量日益减少。对水松的组织培养繁殖技术的研究是克服水松自然繁殖困难的有效方法。水松因其树体高大并且多生长于水边，因此采种困难，扦插繁殖生根率又很低，研究水松组织培养繁殖技术是一条高效快速的扩繁途径，水松种子组培苗瓶内生根非常困难，生根率很低，瓶外生根方法的研究成功为组培快繁濒危孑遗树种水松提供了可靠的技术支撑。

发明内容

本发明提供了一种濒危孑遗树种水松种子组培苗瓶外生根培育方法。

本发明是这样实现的：

一种水松种子组培苗瓶外生根方法，包括种子外植体消毒、外植体启动培养、丛生芽诱导、继代增殖扩繁、组培苗瓶外生根、移栽至营养钵，其操作步骤如下：

(1)外植体消毒：以水松饱满种子为外植体，冲洗干净后用消毒液进行消毒。

(2)外植体启动培养：消毒过的水松种子接种于MS培养基中进行萌发培养，30d时50％的种子成功萌发出芽。

(3)丛生芽诱导：截取带1.5cm下胚轴的无菌苗顶芽为外植体，在培养基I中进行丛芽诱导获得水松丛生芽；

(4)继代增殖扩繁：将诱导出的丛生芽，单个切下伸长芽的顶芽和带侧芽芽段，接种到培养基II中进行增殖，获得继代芽，重复循环继代芽增殖的步骤，直至获得大量足够瓶外生根培养的继代芽；

(5)组培苗瓶外生根：将单个切下生长健壮、高4-6cm的继代芽，用含有200mg.L^-1、300mg.L^-1、500mg.L^-1的α-萘乙酸溶液进行速蘸处理后，移植于装有瓶外生根基质的穴盘中，种植后盖上塑料穴盘盖保湿。

(6)移栽到营养钵：待苗木生根后长势稳定时，移栽到营养钵，并按常规方法进行水肥及病虫害等育苗管理。