[发明专利]胶原蛋白的分阶段混合诱导发酵方法

权利要求书

1.一种胶原蛋白的分阶段混合诱导发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)菌种的纯化与保藏、活化与扩培；

(2)摇瓶、种子罐的种子培养；

(3)发酵罐内菌体培养与甲醇驯化、初始诱导阶段与混合加大诱导阶段；

甲醇驯化过程为：

第一阶段加入甲醇，使发酵罐溶氧下降至16％-20％，维持时间3-4h，之后溶氧回升；第二阶段加入甲醇，使发酵罐内溶氧下降至15％-20％，维持时间2-3h；

初始诱导阶段过程为：

调节发酵罐内的温度为28℃，采用间歇式恒速流加甲醇，控制溶氧在18％-22％，设置搅拌转速为650rpm，流量为1L/(L·min)罐压为0.05MPa并保持不变，待生物量达到240-260g/L时此阶段结束；

混合加大诱导阶段为：

调整发酵罐内温度为25℃，将通气流量由1L/(L·min)提高至1.3L/(L·min)，罐压升高至0.07MPa-0.09MPa，加大甲醇的流加速率以维持18％-22％的溶氧，一直维持到发酵结束，菌体湿重维持恒定或下降幅度超过20g/L，此阶段结束；

(4)将步骤(3)所得的发酵液后处理后，得到胶原蛋白。

2.根据权利要求1所述的胶原蛋白的分阶段混合诱导发酵方法，其特征在于，所述甲醇驯化过程中第一阶段发酵罐内控制甲醇的浓度为0.3％，第二阶段发酵罐内控制甲醇的浓度为0.5％。

3.根据权利要求1所述的胶原蛋白的分阶段混合诱导发酵方法，其特征在于，所述种子罐的种子培养基和发酵罐内菌体培养基为改良后的FBS培养基，其配方为：

4.根据权利要求1所述的胶原蛋白的分阶段混合诱导发酵方法，其特征在于，所述初始诱导阶段采用间歇式恒速流加甲醇，流加速率是3.55-3.95ml/h/L。

5.根据权利要求1所述的胶原蛋白的分阶段混合诱导发酵方法，其特征在于，所述混合加大诱导阶段甲醇的流加速率为9.0-9.30ml/h/L。