[发明专利]检测原料胶中大肠菌群含量的方法有效
申请号: | 201511001131.2 | 申请日: | 2015-12-28 |
公开(公告)号: | CN105420342B | 公开(公告)日: | 2019-03-26 |
发明(设计)人: | 吴玉秋;薛志清;梁春梅;喻东威;宋晓东 | 申请(专利权)人: | 内蒙古蒙牛乳业(集团)股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/24 | 分类号: | C12Q1/24;C12Q1/10;C12Q1/06;C12R1/19 |
代理公司: | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 李志东 |
地址: | 011500 内蒙古自*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 原料 大肠菌 含量 方法 | ||
本发明提出检测原料胶中大肠菌群含量的方法。方法包括:(1)将原料胶置于含有生理盐水的无菌均质袋中,进行第一均质处理,得到第一均质处理产物;(2)将第一均质处理产物置于无菌均质袋中,再向无菌均质袋中加入结晶紫中性红胆盐琼脂培养基,并进行第二均质处理,得到第二均质处理产物;(3)将含有第二均质处理产物的均质袋进行平整化处理;(4)将经过平整化处理的含有第二均质处理产物的均质袋进行静置培养,得到可疑大肠菌群菌落;以及(5)将可疑大肠菌群菌落接种于含有煌绿乳糖胆盐肉汤培养基的试管中进行培养,以便确定大肠菌群菌落数,进而确定对原料胶中大肠菌群含量。本发明的方法能够有效提高检出率,准确性强。
技术领域
本发明涉及食品领域。具体地,本发明涉及检测原料胶中大肠菌群含量的方法。
背景技术
原料胶主要是指能够作为乳化剂用于食品生产的一类胶体物质。由于其本身可携带大肠杆菌,为防止其携带的大肠杆菌进入食品中,引起不良后果,需要对原料胶中大肠杆菌含量进行测定,满足要求的才可应用于食品生产中。
然而,目前测定原料胶中大肠杆菌含量的方法仍有待改进。
发明内容
本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此,本发明的一个目的在于提出检测原料胶中大肠菌群含量的方法。该方法能够有效提高原料胶中大肠菌群含量的检出率,检测结果的准确性强。
在本发明的第一方面,本发明提出检测原料胶中大肠菌群含量的方法。根据本发明的实施例,所述方法包括:(1)将所述原料胶置于装有生理盐水的无菌均质袋中,进行第一均质处理,得到第一均质处理产物;(2)将所述第一均质处理产物置于无菌均质袋中,再向无菌均质袋中加入结晶紫中性红胆盐琼脂培养基,并进行第二均质处理,得到第二均质处理产物;(3)将装有所述第二均质处理产物的均质袋进行平整化处理;(4)将经过所述平整化处理的装有所述第二均质处理产物的均质袋进行静置培养,得到可疑大肠菌群菌落;以及(5)将所述可疑大肠菌群菌落接种于装有煌绿乳糖胆盐肉汤培养基的试管中进行培养,以便确定大肠菌群菌落数,进而确定对所述原料胶中大肠菌群含量。根据本发明的优选实施例,基于1克所述原料胶,所述生理盐水的体积为9毫升。
发明人意外地发现,通过根据本发明实施例的方法,能够准确地检测原料胶中的大肠杆菌含量,有效地避免了现有技术例如目前GB4789.3-2010《食品安全国家标准-食品微生物学检验-大肠菌群的测定》应用于原料胶检测时的缺陷。具体地,利用国标方法,将稀释的样液加入至平皿,再向平皿中倾注培养基,混匀后进行培养。但是,由于原料胶经10倍稀释后,与培养基混合后容易聚集成团,导致成块的原料胶中的大肠杆菌无法接触培养基,进而无法生长,影响检测的准确性及可信度。
需要说明的是,本发明的技术方案是发明人通过大量的筛选试验而获得的,发明人曾经尝试过其他的检测方案,并未获得有效的检测结果。例如,发明人采用过下列检测步骤:(1)将原料胶用生理盐水梯度稀释100倍,得到稀释液;(2)取稀释液与培养基在均质袋中混合,并静置培养,通过计数菌落数以确定原料胶中大肠杆菌含量。将原料胶稀释100倍得到的稀释液与培养基混合静置时,由于原料胶中大肠杆菌含量较少,容易导致每次吸取的稀释液中菌数不同,造成误差。另外,还将使检测限升高。
根据本发明的实施例,上述检测原料胶中大肠菌群含量的方法还可以具有下列附加技术特征:
根据本发明的实施例,所述第一均质处理是在转速为8000~10000r/min的条件下进行1~2min;所述第二均质处理是在转速为8000~10000r/min的条件下进行1min,基于1克所述第一均质处理产物,所述培养基的体积为2~4毫升。由此,能够有效提高原料胶中大肠菌群含量的检出率,检测结果的准确性强。
根据本发明的实施例,所述平整化处理所得到的培养基的厚度为0.1~0.5毫米,优选为0.3~0.4毫米。由此,能够有效提高原料胶中大肠菌群含量的检出率,检测结果的准确性强。
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