[发明专利]茄子隐花色素基因SmCRY2及其用途有效
申请号: | 201511004885.3 | 申请日: | 2015-12-28 |
公开(公告)号: | CN105440116B | 公开(公告)日: | 2019-02-22 |
发明(设计)人: | 刘杨;蒋明敏;任丽;陈火英 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | C07K14/415 | 分类号: | C07K14/415;C12N15/29;C12N15/11;C12Q1/6851;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/20 |
代理公司: | 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 | 代理人: | 郭国中;陈少凌 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 茄子 花色素 基因 smcry2 及其 用途 | ||
本发明公开一种茄子隐花色素基因SmCRY2及其用途,所述基因的cDNA序列包括:(a)如SEQ ID NO.1第1~1944位所示的碱基序列;或(b)与SEQ ID NO.1第1~1944位所示的碱基序列具有至少70%的同源性的碱基序列;或(c)能与SEQ ID NO.1第1~1944位所示的碱基序列进行杂交的碱基序列。所述基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2中所示。该基因在根、茎、叶、花、果皮、果肉均有表达,根和叶中的表达量显著高于其他组织。本发明为今后利用基因工程技术改良植物在弱光中生长不良提供理论依据,具有很大的应用价值。
技术领域
本发明属于生物技术领域,涉及茄子光信号通路中的关键酶及其编码基因,具体涉及一种茄子隐花色素基因SmCRY2及其用途。
背景技术
蓝光和近紫外光可以使植物产生蓝光反应,隐花色素在植物中的主要作用就是作为蓝光和近紫外光的受体,来调节植物的生长发育。在拟南芥中存在3个隐花色素基因CRY1,CRY2和CRY3,其中研究比较多的主要是CRY1和CRY2。CRY1和CRY2蛋白在蓝光照射条件下发生磷酸化,这种磷酸化是特异的依赖于蓝光并随着蓝光光强的增强而增加,而红光和远红光并没有这种效果。CRY1和CRY2蛋白的磷酸化和其功能发挥也是密切相关的,筛选到的CRY1和CRY2功能缺失的cry1和cry2突变体中,有多数是因为突变位点干扰了CRY蛋白的磷酸化。
对隐花色素CRY2生理功能的了解主要是通过分析其功能缺失突变体cry2实现的,对其表型分析显示,cry2突变体在高光强蓝光下其下胚轴长度与野生型差别不大,但在弱蓝光条件下,cry2突变体的下胚轴长度比野生型的稍长。另外,cry2单突变体的子叶面积比野生型的小,说明CRY2参与了子叶面积扩展的调控。cry2突变体另外一个显著的表型就是表现为开花时间的延迟,暗示了CRY2参与到了光周期开花过程的调控。
目前已从很多植物中克隆得到CRY基因,如拟南芥、大豆、玉米、番茄等。茄子是重要的蔬菜作物,但相关研究相对比较滞后。目前,未有任何与茄子CRY2基因及其编码蛋白的相关文献报道。
发明内容
本发明的目的在于填补茄子CRY2基因的空白,提供一种茄子CRY2的cDNA以及氨基酸序列;进一步地,本发明提供了茄子SmCRY2基因在不同组织器官的表达模式。本发明还提供了SmCRY2转入拟南芥后表型发生改变的结果。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的:
第一方面,本发明涉及一种茄子CRY2蛋白,所述蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
第二方面,本发明涉及一种编码茄子CRY2蛋白的SmCRY2基因,所述SmCRY2基因的cDNA序列包括:
(a)如SEQ ID NO.1第1~1944位所示的碱基序列;或
(b)与SEQ ID NO.1第1~1944位所示的碱基序列具有至少70%的同源性的碱基序列;或
(c)能与SEQ ID NO.1第1~1944位所示的碱基序列进行杂交的碱基序列。
优选的,所述cDNA序列包括SEQ ID NO.1第1~1944位所示的核酸序列中1~90个核苷酸的缺失、插入和/或取代,以及在5′和/或3′端添加60个以内核苷酸。
第三方面,本发明涉及一种用于扩增SmCRY2基因的引物对,所述引物对的碱基序列如SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示。
第四方面,本发明涉及一种SmCRY2基因在植物组织中表达量的定量分析方法,所述方法包括如下步骤:
S1、获得植物组织,提取其总RNA;
S2、以所述总RNA为模板,反转录获得cDNA;
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