[发明专利]一种猪繁殖与呼吸综合征病毒稀释液及其制备方法

权利要求书

1.一种猪繁殖与呼吸综合征病毒稀释液，其特征在于每1000ml磷酸缓冲液中含有以下 重量配比的组分：氨基酸组合10～30g、复方中药多糖10～30g和脂质体10～30g，所述的氨 基酸组合包括叶酸、核黄素磷酸钠、右泛醇和抗坏血酸，所述的复方中药多糖由独活、云香 草、蔓荆子、密蒙花、玄参和赤芍提取得到。

2.如权利要求1所述的一种猪繁殖与呼吸综合征病毒稀释液，其特征在于该稀释液的 pH为7.0～7.5。

3.如权利要求1所述的一种猪繁殖与呼吸综合征病毒稀释液，其特征在于所述的磷酸 缓冲液由氯化钠6～10g，氯化钾0.05～0.5g，磷酸氢二钠1～1.2g，磷酸二氢钾0.05～0.5g， 氯化钙0.05～0.2g，含6个结晶水的氯化镁0.05～0.2g溶于1000ml双蒸水中得到。

4.如权利要求1所述的一种猪繁殖与呼吸综合征病毒稀释液，其特征在于所述的每 1000ml磷酸缓冲液中含有以下重量配比的组分：氨基酸组合14～26g、复方中药多糖15～ 25g和脂质体12～28g。

5.如权利要求1所述的一种猪繁殖与呼吸综合征病毒稀释液，其特征在于所述的氨基 酸组合含有以下重量百分比含量的氨基酸：叶酸20～40%、核黄素磷酸钠10～40%、右泛醇10 ～30%和抗坏血酸30～60%。

6.如权利要求1所述的一种猪繁殖与呼吸综合征病毒稀释液，其特征在于所述的脂质 体按以下步骤制得：按大豆卵磷脂3重量份和甘氨胆酸1重量份称取大豆卵磷脂和甘氨胆 酸，用氯仿进行溶解，并使其混合均匀，并通过减压法去除溶液中氯仿，制备脂质体膜；配制 pH值为7.0～8.0、浓度为0.1m/l的枸橼酸和枸橼酸钾缓冲溶液，将该缓冲溶液加入到脂质 体膜溶液中，脱水后用匀浆机制备成脂质体。

7.如权利要求1所述的一种猪繁殖与呼吸综合征病毒稀释液，其特征在于所述的复方 中药多糖按以下步骤制得：

a、按独活5～20份、云香草10～30份、蔓荆子10～30份、密蒙花5～20份、玄参10～30和 赤芍20～40份称取各中药原料，切碎、洗净后用冷水浸泡过夜，再加入原料重量15倍的纯化 水，水浴至90℃，并保持在90℃，熬制2小时，熬制过程中每10分钟搅拌一次；

b、弃去a中药渣，收集药液，室温冷却后经10000rpm离心10分钟，弃去沉淀，收集上清；

c、将b中上清进行醇沉，沉淀得到粗制中药多糖；

d、用灭菌纯化水洗涤c中粗制中药多糖，洗涤后用20倍量的42℃灭菌纯化水进行溶解， 溶解后，按0.5%比例加入活性炭4℃吸附过夜，吸附后经10000rpm离心10分钟，弃去沉淀，收 集上清；

e、将d中上清液进行10倍浓缩，制得中药多糖浓缩液；

f、将e中中药多糖浓缩液进行真空冷冻干燥制得复方中药多糖。

8.如权利要求7所述的一种猪繁殖与呼吸综合征病毒稀释液，其特征在于所述的步骤a 中按独活10～15份、云香草15～25份、蔓荆子15～25份、密蒙花10～15份、玄参15～25和赤 芍25～35份称取各中药原料。

9.一种猪繁殖与呼吸综合征病毒稀释液的制备方法，其特征在于包括以下工艺步骤：

1）磷酸缓冲溶液的配制：

按氯化钠6～10g，氯化钾0.05～0.5g，磷酸氢二钠1～1.2g，磷酸二氢钾0.05～0.5g，氯 化钙0.05～0.2g，含6个结晶水的氯化镁0.05～0.2g溶于1000ml双蒸水中，无菌条件下通过 0.22μm滤膜，过滤除菌备用；

2）复方中药多糖的制备：

a、按独活5～20份、云香草10～30份、蔓荆子10～30份、密蒙花5～20份、玄参10～30和 赤芍20～40份称取各中药原料，切碎、洗净后用冷水浸泡过夜，再加入原料重量15倍的纯化 水，水浴至90℃，并保持在90℃，熬制2小时，熬制过程中每10分钟搅拌一次；

b、弃去a中药渣，收集药液，室温冷却后经10000rpm离心10分钟，弃去沉淀，收集上清；

c、将b中上清进行醇沉，沉淀得到粗制中药多糖；

d、用灭菌纯化水洗涤c中粗制中药多糖，洗涤后用20倍量的42℃灭菌纯化水进行溶解， 溶解后，按0.5%比例加入活性炭4℃吸附过夜，吸附后经10000rpm离心10分钟，弃去沉淀，收 集上清；

e、将d中上清液进行10倍浓缩，制得中药多糖浓缩液；

f、将e中中药多糖浓缩液进行真空冷冻干燥制得复合中药多糖冻干粉；

3）脂质体按的制备：

按大豆卵磷脂3重量份和甘氨胆酸1重量份称取大豆卵磷脂和甘氨胆酸，用氯仿进行溶 解，并使其混合均匀，并通过减压法去除溶液中氯仿，制备脂质体膜；配制pH值为7.0～8.0、 浓度为0.1m/l的枸橼酸和枸橼酸钾缓冲溶液，将该缓冲溶液加入到脂质体膜溶液中，脱水 后用匀浆机制备成脂质体；

4）猪繁殖与呼吸综合征病毒稀释液的配制：

按氨基酸组合10～30g、复方中药多糖10～30g和脂质体10～30g称取各原料，所述的按 氨基酸组合含有叶酸20～40%、核黄素磷酸钠10～40%、右泛醇10～30%和抗坏血酸30～60%， 将上述原料溶解于步骤1）制得的磷酸缓冲溶液中，充分混匀，用酸或碱调节pH至7.0～7.5 之间，无菌条件下通过0.22μm滤膜，过滤除菌后置4℃保存备用。