[发明专利]斑马鱼测定农药颗粒剂毒性的方法

权利要求书

1.一种斑马鱼测定农药颗粒剂毒性的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将农药颗粒剂溶解，制成农药储备液；

(2)将所述农药储备液与水混合配制成梯度浓度的混合液，将所述混合液做为斑马鱼的 生活用水，持续培养96h，培养过程中，每隔24h时记录斑马鱼的生物效应参数和所述混合 液的理化参数；

(3)根据斑马鱼的生物效应参数计算农药对斑马鱼的半数致死浓度LC₅₀值，判断农药 颗粒剂的毒性。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)具体为：将所述农药颗粒 剂，用丙酮和吐温-80的混合溶液溶解、超声、过滤得到所述农药储备液。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述丙酮和吐温-80的混合溶液中，吐温 -80的质量浓度小于0.1％，所述丙酮的质量浓度小于0.1mL/L。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中所述斑马鱼选择体长为 1～3cm、健康活泼的斑马鱼。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在采用斑马鱼测定农药颗粒剂毒性之前 24h内，所述斑马鱼不喂食，在所述步骤(2)进行的过程中，所述斑马鱼不喂食。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中所述水为曝气水，所述 曝气水的硬度为10～240mg/L，pH为6.0～8.5，溶解氧含量高于空气饱和值的80％。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述生 物效应参数为鱼的死亡率和中毒症状；所述中毒症状为：斑马鱼出现了侧游、侧卧缸底或身 体明显弯曲等；所述理化参数为混合液的水温、pH值、溶解氧含量。

8.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述培 养过程控制水温为21～25℃、每日光照12～16h、溶解氧含量高于空气饱和值的60％。

9.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其特征在于，所述农药颗粒剂的毒性的判 断标准为：LC₅₀＞10.0mga.i./L表示低毒，1.00mga.i./L＜LC₅₀≤10.0mga.i./L表示中毒， 0.100mga.i./L＜LC₅₀≤1.00mga.i./L表示高毒，LC₅₀≤0.100mga.i./L表示剧毒。

10.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其特征在于，所述斑马鱼测定农药颗粒 剂毒性的方法还设有空白对照组和溶剂对照组；所述空白对照组以水为斑马鱼的生活用水； 所述溶剂对照组以丙酮和吐温-80的混合溶液为所述斑马鱼的生活用水；所述空白对照组和溶 剂对照组中不存在鱼死亡现象和中毒症状则证明实验结果可信。