[发明专利]LCE3E在诊治口腔癌中的应用

说明书

本发明涉及LCE3E在诊治口腔癌中的应用。发明人通过高通量测序平台进行转录组深度测序分析，初步筛选出在口腔鳞状细胞癌组织和正常组织中差异表达明显的基因LCE3E，进一步RT‑PCR实验证实了LCE3E基因在口腔鳞状细胞癌组织高表达，siRNA干扰实验显示干扰LCE3E基因的表达能够有效抑制口腔癌细胞增殖，本发明的口腔癌分子标记具有重要的临床实际应用价值。

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，具体地，涉及LCE3E在诊治口腔癌中的应用，更具体的涉及LCE3E在诊断和治疗口腔鳞状细胞癌诊断中的应用。

背景技术

当今社会，癌症是威肋、人类健康及生命的重要致死因素之一。据最新的《世界癌症报告》统计，2014年全球新增癌症病例1400万，其中中国有307万，占21.8％，癌症死亡人数全球约820万，其中中国有220万，占26.9％，而统计的中国患癌症占全球比例时，食道癌的新增病例与死亡人数均占到全球50％，是危害我国人群身体健康的头号杀手，在食管癌中口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma，OSCC)是最为常见的类型，预后较差。尤其是晚期口腔鳞状细胞癌患者，因其晚期阶段易淋巴转移及远处转移，且原发灶局部涉及多个重要器官，使肿瘤扩大切除的安全缘受限，即便通过手术、放疗、化疗及生物治疗的综合序列治疗，其5年生存率仍然很低。肿瘤的发生发展是一个多因素、多阶段、多步骤的过程，口腔鳞状细胞癌亦如此，环境对机体的作用及机体自身的变化导致了口腔黏膜从正常口腔鳞状上皮细胞到过角化、不同程度的异常增生，再到原位癌、侵袭性癌的演变过程。口腔鳞状细胞癌发生发展过程中涉及多种不同基因的改变，然而其确切的发生发展机制还不明确，通过分析筛选出的生物分子标记物的表达与肿瘤的相关性，分析其作为诊断或预后预测标记物的可行性，有望更早的发现肿瘤或指导制定针对患者个体的个性化治疗方案。

发明人通过高通量测序平台选取2例口腔鳞状细胞癌癌组织及3例健康的正常组织的转录组深度测序分析，初步筛选出在口腔鳞状细胞癌组织和正常组织中差异表达明显的基因LCE3E，进一步RT-PCR实验证实了LCE3E基因在口腔鳞状细胞癌组织高表达，干扰LCE3E基因的表达能抑制口腔癌细胞的增殖，本发明的分子标志物具有重要的临床实际应用价值。

发明内容

本发明的目的在于提供一种口腔癌诊断制剂，所述口腔癌诊断制剂检测LCE3E基因和/或LCE3E基因的表达产物。

进一步，口腔癌为口腔鳞状细胞癌。

进一步，口腔癌诊断制剂采用荧光定量PCR试剂盒、基因芯片、免疫方法检测口腔癌组织中LCE3E基因的表达，优选的，荧光定量PCR试剂盒中含有一对特异性扩增LCE3E基因的引物；基因芯片中包括与LCE3E基因的核酸序列杂交的探针，更优选的，荧光定量PCR试剂盒内含有特异性检测LCE3E基因的上游引物和下游引物，上游引物序列为SEQ ID NO.9，下游引物序列为SEQ ID NO.10。

进一步，直接检测组织中LCE3E基因和/或基因的表达产物。

进一步，口腔癌的诊断制剂采用免疫方法检测口腔癌组织中LCE3E基因的表达产物，优选的，免疫方法为ELISA检测和/或胶体金检测。

进一步，检测LCE3E表达产物的ELISA法为使用ELISA检测试剂盒。试剂盒中的抗体可采用市售的LCE3E单克隆抗体。进一步，试剂盒包括：包被LCE3E单克隆抗体的固相载体，酶标抗体，酶的底物，蛋白标准品，阴性对照品，稀释液，洗涤液，酶反应终止液等。

进一步，检测LCE3E蛋白的胶体金法为使用检测试剂盒，抗体可采用市售的LCE3E单克隆抗体。进一步，胶体金检测试剂盒采用胶体金免疫层析技术或胶体金渗滤法。进一步，胶体金检测试剂盒硝酸纤维素膜上的检测区(T)喷点有抗LCE3E单克隆抗体、质控区(C)喷点有免疫球蛋白IgG。

本发明的目的在于提供上述口腔癌诊断制剂在制备口腔癌诊断工具中的应用。