[发明专利]一种基于GH和IGF‑1基因血液生化标记选育武定鸡的方法

说明书

技术领域

本发明属于家禽血液生化标记技术领域，具体地说，涉及一种基于GH和IGF-1基因血液生化标记选育武定鸡的方法。

背景技术

家禽生长发育受到多种因素的影响，而随着家禽业的发展，对鸡生长研究的不断深入，发现了与生长发育相关的基因，GH、GH受体、GHBP、IGF-1、IGF-2、IGF受体和6个IGF结合蛋白(IGFBP)，这些生长轴上的基因都是参与家禽生长发育必不可少的组成部分，其中GH和IGF-1浓度水平的变化，决定了生长快慢的差异。

生长激素(GH)基因是动物调节生长发育的重要激素，Ruqian Zhao，等(2003)研究表明，在早期孵化后的阶段，更快速增长的鸡的品系显示较低的GH循环水平。在D5、D21、D42的蛋鸡和肉鸡的血浆中通过观察GH的脉动性(含量)对体重的影响，得出肉鸡在D5开始一直高于蛋鸡，在D21、D42时，更是分别达到了4和5倍的体重于蛋鸡。

胰岛素样生长因子—1(IGF-1)基因是生长轴上影响家禽生长速度的最重要基因之一，Yakar S，等(2010)研究证实血浆IGF-1的损失造成身材矮小和骨骼纤细且脆，以及在增加的体重后，对骨的适应性都有重要的意义。这些报道都有力地证明了生长轴上相关基因在动物的生长发育中占有的重要地位。

体重为数量性状，受微效多基因系统控制，在生长发育中呈动态变化，其遗传进展缓慢。因此标记辅助选择是提高鸡生长性状遗传进展的有效途径，通过测定生长轴相关基因在武定鸡体内的浓度水平，寻找与武定鸡体重密切相关的血液生化标记，加快早期的育种进程。

目前，尚无有关云南武定鸡生长轴上相关基因作为鸡生长性状的血液生化标记，为加快武定鸡早期的育种进程，满足人们对地方鸡种的需求，有必要探讨一种能与武定鸡体重密切相关的血液生化标记，提供选育快长型云南武定鸡的新方法。

发明内容

针对上述问题，本发明提出一种基于GH和IGF-1基因血液生化标记选育武定鸡的方法，通过测定生长轴上相关基因GH和IGF-1在慢长型和快长型武定鸡中的浓度变化，结合测量的武定鸡的体重值，建立血液生化标记，为武定鸡的早期育种提供理论基础，同时也是探索武定鸡的育种新方法，为云南地方鸡种在育种工作中提供新思路。

为实现上述目的，本发明是通过如下技术方案实现的：

一种基于GH和IGF-1基因血液生化标记选育武定鸡的方法，具体步骤为：

1)采集待测武定鸡的血液，制备血清，检测血清中GH、IGF-1的浓度值；

2)将步骤1)测得的浓度值与武定鸡血液生化标记进行对比，将待测武定鸡区别为快长型武定鸡和慢长型武定鸡；所述武定鸡血液生化标记的确立步骤为：

a、从武定鸡资源群体中随机选择慢长武定鸡家系和快长武定鸡家系，分别测量体重，采集血液，收集血浆；

b、选用GH、GHBP和IGF-1酶联免疫分析试剂盒按步骤进行，应用双抗体夹心法测定样品中鸡的相关基因的水平，然后用酶标仪在450nm波长下测定吸光度，最后通过标准曲线计算样品中GH、GHBP和IGF-1的含量；

c、根据步骤b所得数据，得出慢长型武定鸡和快长型武定鸡各生长相关基因的浓度值，再根据所选取武定鸡的体重值，进行生长相关基因与体重的相关性分析；

d、根据步骤c所得到的分析结果确定武定鸡的血液生化标记。

进一步地，所述的云南武定鸡的血液生化标记为GH、IGF-1基因的浓度值，在一月龄时，当GH基因的浓度值在2.83±0.03ug/l以上，且IGF-1基因的浓度值在2.51±0.02ug/l以下，判定为慢长型武定鸡，反之为快长型武定鸡；在二月龄时，当GH基因的浓度值在1.52±0.07ug/l以上，IGF-1基因的浓度值在2.37±0.05ug/l以下，判定为慢长型武定鸡，反之为快长型武定鸡。

进一步地，在一月龄时，当GH基因的浓度值在2.83ug/l以上，IGF-1基因的浓度值在2.51ug/l以下，判定为慢长型武定鸡，反之为快长型武定鸡；在二月龄时，当GH基因的浓度值在1.52ug/l以上，IGF-1基因的浓度值在2.37ug/l以下，判定为慢长型武定鸡，反之为快长型武定鸡。

进一步地，选用含有EDTA二钾的抗凝剂的采血管采集血液，混合后，采用低温3000rpm离心10分钟，仔细收集上清，获得血浆。