[发明专利]一种茎类蔬菜中544种农药残留LC-Q-TOF/MS侦测技术

权利要求书

1.一种用于检测茎类蔬菜中544种农药残留的侦测方法，其特征在于：通 过建立544种农药的TOF/MS数据库和Q-TOF/MS数据库，将目标化合物的色 谱质谱信息与TOF/MS数据库和Q-TOF/MS数据库的信息检索匹配，实现了无 需标准物作对照，同时对农产品中500种以上农药进行定性侦测与确证；所述的 544种农药为表1中编号为1-544的农药。

2.一种如权利要求1所述的TOF/MS数据库，其特征在于：通过以下方法 构建数据库：在TOF/MS模式下，分别测定每种农药标准物在指定色谱质谱条 件下的保留时间，确定该化合物ESI源下的离子化形式，选择+H，+NH₄，+Na，及 化学式，得到每种化合物母离子的精确质量数，同位素峰分布和丰度比，将544 种农药的名称、保留时间、分子式、精确质量数、同位素峰分布和丰度比信息导 入到数据库CSV文件中，形成TOF/MS数据库。

3.一种如权利要求1所述的Q-TOF/MS数据库，其特征在于：通过以下方 法构建数据库：在数据采集界面依次输入如权利要求2中所述TOF/MS数据库 中544种农药的母离子，在Q-TOF/MS模式下，对544种农药分别在8个碰撞 能量下，进行碎片离子全扫描质谱图采集，优选其中离子信息丰富的3-5个不同 碰撞能量下碎片离子全扫描质谱图导入数据库软件文件中，并与对应的农药信息 相关联，建成Q-TOF/MS数据库。

4.根据权利要求1所述的侦测方法，其特征在于：对于农药残留的侦测不 需要农药标准物作对照。

5.根据权利要求1所述的侦测方法，其特征在于，所述方法包括以下程序：

(a)样品制备：茎类蔬菜样品经醋酸乙腈匀浆提取，经脱水和离心、浓缩 后，再经Carbon/NH₂柱净化，乙腈+甲苯洗脱残留农药，经浓缩、过滤后制成待 测样液a；

(b)色谱质谱检测：采用配有反相色谱柱的液相色谱，在特定色谱条件下， 分离待测样液a中的农药；采用配有电喷雾离子源的LC-Q-TOF/MS-MS，在特 定质谱条件下，检测农药；

(c)TOF/MS数据库筛查：在定性软件中调用已建立的如权利要求2所述 的TOF/MS数据库，依据TOF/MS数据库对质谱检测结果中目标化合物定性检 索，检索参数保留时间偏差限定为±0.5min，精确质量偏差限定为±10ppm，离子 化形式选择+H，+NH₄，+Na模式，依据每种化合物各要素的实测值与TOF/MS 数据库中理论值的偏差，给出检索匹配得分值，检索匹配得分值＞70的化合物， 为疑似检出化合物；

(d)Q-TOF/MS数据库确证：在TargetedMS/MS采集模式下，输入疑似检 出化合物的母离子，保留时间和最佳的碰撞能量，对待测样液a再次检测，将检 测谱图与如权利要求3所述的Q-TOF/MS数据库中谱图，在镜像对比条件下匹 配确证，其匹配得分值＞70，即确认检出该目标化合物。

6.根据权利要求5所述的侦测方法，其特征在于：步骤(a)中，所述茎类 蔬菜包括芦笋。

7.根据权利要求5所述的侦测方法，其特征在于：步骤(a)中，所述 Carbon/NH₂柱净化步骤如下：在Carbon/NH₂柱中加入无水硫酸钠，先用乙腈+ 甲苯混合液淋洗SPE柱，并弃去流出液，当液面到达硫酸钠的顶部时，迅速将 样品浓缩液转移至净化柱上，下接新鸡心瓶接收；再乙腈+甲苯混合液洗涤样液 瓶三次，并将洗涤液移入SPE柱中；再用乙腈+甲苯混合液洗脱农药，合并洗脱 液于鸡心瓶中。

8.根据权利要求5所述的侦测方法，其特征在于：步骤(a)中，所述经浓 缩、过滤后制成待测样液a是指权利要求7所得到的洗脱液，在40℃水浴中旋 转浓缩，并将浓缩液置于氮气下吹干，加入乙腈+甲酸水混匀，经滤膜过滤后定 容，得到待测样品溶液a。