[发明专利]猪德尔塔冠状病毒SYBR Green I荧光定量RT-PCR检测引物及检测方法在审
申请号: | 201511018859.6 | 申请日: | 2015-12-31 |
公开(公告)号: | CN105483290A | 公开(公告)日: | 2016-04-13 |
发明(设计)人: | 胡慧;郑兰兰;梁秀丽;魏战勇;张君涛;曹贝贝;张利卫 | 申请(专利权)人: | 河南农业大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 郑州优盾知识产权代理有限公司 41125 | 代理人: | 张绍琳;张真真 |
地址: | 450002 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 猪德尔塔 冠状病毒 sybr green 荧光 定量 rt pcr 检测 引物 方法 | ||
1.猪德尔塔冠状病毒SYBRGreenI荧光定量RT-PCR检测引物,其特征在于:
猪德尔塔冠状病毒的引物序列如下:
上游引物:5'-TTAGTCGGGTCCTTTGCG-3'
下游引物:5'-ACTCTCGTTGAAAGTCCG-3'
扩增猪德尔塔冠状病毒基因部分片段260bp。
2.利用权利要求1所述引物检测猪德尔塔冠状病毒SYBRGreenI荧光定量RT-PCR检测 方法,该方法不用于疾病的诊断和治疗,包括提取病毒的DNA后,按如下SYBRGreenⅠ荧 光定量RT-PCR反应体系和反应条件对病毒进行检测,其特征在于:
所述SYBRGreenⅠ荧光定量RT-PCR反应体系,在20μl体系中加入以下成份:上游引 物0.5μL,下游引物0.5μL,质粒模板1μL,SYBRPremixExTaqⅠ10μL,ddH2O8μL;
所述反应条件为:扩增参数为95℃3min;95℃10s、53℃30s、72℃30s,循环35 次。
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