[发明专利]一种委陵菜属植物提取物及从中分离四种单宁类化合物的方法

权利要求书

1.一种委陵菜属植物小叶金露梅提取物，其特征在于：其含有不低于6％w/w的原 花青素B7或/和不低于4％w/w的2,3,4,6-四-O-没食子酰葡萄糖。

2.根据权利要求1所述的提取物，其特征在于：所述提取物还含有不低于14％w/w 原花青素B3和不低于7％w/w的原花青素B6。

3.根据权利要求2所述的提取物，其特征在于：所述提取物含有15～16％w/w的原 花青素B3，8～9％w/w的原花青素B6，7～8％w/w的原花青素B7和5～6％w/w的2,3,4,6- 四-O-没食子酰葡萄糖；

优选的，所述2,3,4,6-四-O-没食子酰葡萄糖中，α-型2,3,4,6-四-O-没食子酰葡萄糖与 β-型2,3,4,6-四-O-没食子酰葡萄糖的摩尔比为3:1。

4.一种制备权利要求1-3任一项所述小叶金露梅提取物的方法，其特征在于：包括 以下步骤：

(1)制备小叶金露梅醇粗提物：取小叶金露梅，切割或粉碎，醇提取，浓缩得到小 叶金露梅醇粗提物；

(2)制备小叶金露梅醇粗提物的乙酸乙酯萃取部分：取步骤(1)制备得到醇粗提物， 石油醚萃取，取剩余液体，乙酸乙酯萃取，得到小叶金露梅醇粗提物的乙酸乙酯萃取部分；

(3)制备富集所述四种单宁类化合物的浓缩物：以硅胶柱色谱分离步骤(2)制备得 到的乙酸乙酯萃取部分，以石油醚-乙酸乙酯体积比100:0～0:100梯度洗脱，收集石油醚- 乙酸乙酯体积比1:1～0:100的流分，浓缩即得；优选0:100的流分。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：

步骤(1)中，所述醇是60％-90％的乙醇，优选70％乙醇；所述提取的温度是60℃； 提取的次数是3次；每次提取时，醇与小叶金露梅的体积质量比为30:6.5L/Kg；

步骤(2)中，所述石油醚的萃取次数为2～10次，每次萃取时，与醇粗提物的体积 比为1:8；所述乙酸乙酯的萃取次数为2～10次，每次萃取时，与醇粗提物的体积比为1:10；

步骤(3)中，所述梯度洗脱是依次以石油醚-乙酸乙酯的体积比为100：1、50：1、 10：1、1：1、2：3的洗脱液和乙酸乙酯洗脱液进行的梯度洗脱；与小叶金露梅的体积质 量比依次为3：6.5、4：6.5、6：6.5、10：6.5、10.5：6.5和11.5：6.5L/Kg。

6.根据权利要1-4任一项所述的提取物，其特征在于：所述提取物是由权利要求4 或5所述的方法制备得到的小叶金露梅提取物。

7.一种分离制备四种单宁类化合物的方法，其特征在于：所述四种单宁类化合物为 原花青素B3、原花青素B6、原花青素B7和2,3,4,6-四-O-没食子酰葡萄糖，包括以下步 骤：

利用高速逆流色谱法分离制备四种单宁类化合物：

(a)取权利要求6所述的小叶金露梅提取物，溶于进样溶剂中，制备得到进样溶液；

(b)将进样溶液注入高速逆流色谱仪，检测收集原花青素B3、原花青素B6、原花 青素B7和2,3,4,6-四-O-没食子酰葡萄糖的流分，除去溶剂，即得原花青素B3、原花青素 B6、原花青素B7和2,3,4,6-四-O-没食子酰葡萄糖的产品；

所述高速逆流色谱法的固定相为两相溶剂体系的上相，流动相为两相溶剂体系的下 相；所述两相溶剂体系由正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水＝(0.8～1.2):(10.8～11.2):(1～1.4): (10.8～11.2)(v/v)组成，优选的比例为1:11:1.2:11(v/v)。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述进样溶剂是由所述上相和下相按 照1:1的体积比组成的溶剂；所述进样溶剂与提取物的体积质量比为1:15～1:30mL/mg； 所述高速逆流色谱仪中分离管的转速为900±50rpm，所述高速逆流色谱仪中分离管的温 度设置为30±5℃，所述流动相的流速为1.2±0.3mL/min，所述检测的波长为270±5nm。