[发明专利]一种CD105纳米抗体Nb68

说明书

本发明公开了针对于CD105多肽分子抗原表位的一种CD105纳米抗体，同时还公布了编码该CD105纳米抗体的基因序列以及能够表达该CD105纳米抗体的表达载体和宿主细胞，并且公开了该CD105纳米抗体的用途。通过本发明公开的CD105纳米抗体、基因序列及宿主细胞等，可以在大肠杆菌内高效表达出CD105纳米抗体，其与CD105免疫反应特异性好、亲和力高，可应用于制备CD105检测试剂或抗肿瘤药物等。

技术领域

本发明属于生物医学或生物制药技术领域，更具体地说，涉及一种针对于CD105多肽分子抗原表位分子的纳米抗体(Nb68)、其编码序列及用途。

背景技术

CD105又名endoglin,为内皮细胞细胞膜表达的糖蛋白，是转化生长因子β(transform growthfactor,TGF-β)受体复合物的成分之一，但能独立存在于细胞表面。CD105含有633个氨基酸，相对分子质量约为68051，是一种与增殖相关的并可被缺氧诱导的蛋白，其胞膜外部分含有561个氨基酸，跨膜区域含有25个氨基酸，胞膜内部分含有47个氨基酸，构成CD105的尾部。在CD105的细胞外部分，有4个潜在的糖基化位点，分别是第63位、96位、109位和282位氨基酸残基。这些糖基化位点可以被N-糖苷酶或内糖苷酶F修饰，因此证明这些位点具备功能。

CD105作为一种细胞膜糖蛋白，在增殖的内皮细胞和肿瘤组织的新生血管内皮细胞中呈过表达，而在正常成熟的血管内皮细胞中不表达或弱表达。它是抑制肿瘤血管生成、治疗肿瘤的重要靶分子，与肿瘤组织浸润、转移有关。因此，作为一种可靠的肿瘤新生血管标志物将为临床的诊断、治疗及预后的判断提供重要的参考信息。

然而，目前市场上使用的CD105检测试剂主要是通过FITC荧光素标记的抗CD105单克隆抗体来实现的，这种传统方法存在抗体稳定性差、灵敏度低、生产成本高等缺点。

纳米抗体技术，是生物医学科学家在传统抗体的基础上，运用分子生物学技术结合纳米粒子科学的概念进行的抗体工程革命，从而研发出的最新和最小的抗体分子，最初由比利时科学家莱曼德.哈马斯在骆驼血液中发现。普通的抗体蛋白由两条重链和两条轻链组成，而从骆驼血液中发现的新型抗体只有两条重链，没有轻链，这些“重链抗体”能像正常抗体一样与抗原等靶标紧紧结合，但不像单链抗体那样相互黏连聚集成块。以该“重链抗体”为基础的纳米抗体不仅分子量只是普通抗体的1/10，而且化学性质也更加灵活，稳定性好，可溶性高，表达容易且容易获得，并容易偶联其他分子。但是，现有技术中并没有针对CD105研发出适用的纳米抗体。

发明内容

本发明要解决的技术问题在于，针对现有技术中缺乏针对CD105表位的纳米抗体的缺陷，提供一种CD105纳米抗体，同时提供编码该CD105纳米抗体的DNA分子以及该纳米抗体的用途等。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：本发明的第一方面，提供了一种CD105纳米抗体，该CD105纳米抗体为针对CD105表位的纳米抗体，包括两条如SEQ ID NO：9所示氨基酸序列的VHH链。本发明中该CD105纳米抗体可以简称为Nb68。

本发明第二方面，提供了一种针对CD105纳米抗体的VHH链，包括框架区FR和互补决定区CDR，所述框架区FR包括下组的FR的氨基酸序列：SEQ ID NO：1所示的FR1，SEQ IDNO：2所示的FR2，SEQ ID NO：3所示的FR3，SEQ ID NO：4所示的FR4；所述互补决定区CDR包括下组的CDR的氨基酸序列：SEQ ID NO：5所示的CDR1，SEQ ID NO：6所示的CDR2，SEQ ID NO：7所示的CDR3。框架区结构相对保守，主要起着维持蛋白质结构的作用；互补决定区结构相对多样化，主要负责抗体的识别。

优选地，所述针对CD105纳米抗体的VHH链，它具有SEQ ID NO：9所示的氨基酸序列。