[发明专利]一种球磨制备燕麦多肽的方法在审
申请号: | 201511023716.4 | 申请日: | 2015-12-31 |
公开(公告)号: | CN105420328A | 公开(公告)日: | 2016-03-23 |
发明(设计)人: | 李璐;肖平波;粟桂民;赵冬 | 申请(专利权)人: | 桂林西麦生物技术开发有限公司 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/14 |
代理公司: | 桂林市持衡专利商标事务所有限公司 45107 | 代理人: | 石晓玲 |
地址: | 541004 广西壮*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 磨制 燕麦 多肽 方法 | ||
1.一种球磨制备燕麦多肽的方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)预处理:先将燕麦清理筛选,然后粉碎,且过80目筛,得到燕麦粉;
(2)脱脂处理:将经步骤(1)处理得到的燕麦粉用60~70%乙醇在60~70℃条件下浸泡1~2h,冷却,倾去上液,得到沉淀燕麦粉;
(3)微波干燥:将经步骤(2)处理得到的沉淀燕麦粉进行微波干燥:微波功率40~50kW、微波时间10~15min;
(4)碱水提取:先将经步骤(3)处理得到的燕麦粉用30~40℃温水浸泡,浸泡4~8min,其中料液比为1:10~15,其次再用转速为200~300转/min的球磨机球磨,球磨10~20min,然后用碳酸钠溶液调节球磨后混合物pH值至8.0~11.0,最后继续用转速为200~300转/min的球磨机球磨球磨,球磨20~30min,过滤,并收集滤液;
(5)离心分离滤液:将经步骤(4)处理得到的滤液置于4000~5000转的离心机上离心15~20分钟,并收集上清液1;
(6)超声处理:将经步骤(5)处理得到的上清液1置于超声频率为30~40KHz,超声温度40~50℃下提取,提取20~30min;
(7)淀粉酶处理:先将经步骤(6)处理得到的提取液调节酶解pH值至6.0~7.0、酶解温度为30~40℃,然后加入低温α-淀粉酶进行酶解,淀粉酶添加量为0.08~0.18%,最后再用转速为200~300转/min的球磨机球磨,球磨20~30min;
(8)糖化酶、β-葡聚糖酶处理:先将经步骤(7)处理得到的酶解液调整温度至50~60℃,并调节pH值至4.0~6.0,然后依次加入糖化酶和β-葡聚糖酶进行酶解,糖化酶、β-葡聚糖酶的添加量分别为0.05~0.12%、0.06~0.16%,最后再用转速为200~300转/min的球磨机球磨,球磨20~30min;
(9)离心分离酶解液:将经步骤(8)处理得到的酶解液置于4000~5000转的离心机上离心20~30分钟,并收集上清液2;
(10)等电点沉淀:将经步骤(9)处理得到的上清液2调节pH值至3.0~4.0,静置40~60min;
(11)离心分离蛋白:将经步骤(10)处理得到的沉淀溶液置于7000~8000转的离心机上离心10~15分钟,并收集燕麦蛋白固体;
(12)碱蛋白酶处理:先将经步骤(11)处理得到的燕麦蛋白固体用15~20倍质量的去离子水复溶,并调整pH值为9~10、温度至45~55℃,然后加入碱蛋白酶进行酶解,碱蛋白酶的添加量为0.04~0.08%,最后再用转速为200~300转/min的球磨机球磨,球磨30~40min;
(13)灭酶后离心分离:将经步骤(12)处理得到的酶解液加热到80~90℃,保温10~15min后,置于4000~5000转的离心机上离心15~20分钟,并收集上清液3;
(14)冷冻干燥:将经步骤(13)处理得到的上清液3进行冷冻干燥,得到燕麦多肽。
2.根据权利要求1所述的球磨制备燕麦多肽的方法,其特征在于:步骤(7)中淀粉酶处理:先将经步骤(6)处理得到的提取液调节酶解pH值至6.5、酶解温度为35℃,然后加入低温α-淀粉酶进行酶解,淀粉酶添加量为0.13%,最后再用转速为250转/min的球磨机球磨,球磨25min。
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