[发明专利]一种提高内生真菌发酵产物中紫杉醇产量的方法有效
| 申请号： | 201511027713.8 | 申请日： | 2015-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN105400842B | 公开（公告）日： | 2018-10-12 |
| 发明（设计）人： | 程俊文;贺亮;魏海龙;胡传久;方茹;李海波 | 申请（专利权）人： | 浙江省林业科学研究院 |
| 主分类号： | C12P17/02 | 分类号： | C12P17/02;C12R1/77 |
| 代理公司： | 浙江永鼎律师事务所 33233 | 代理人： | 郭小丽 |
| 地址： | 310023 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提高 真菌 发酵 产物 紫杉醇 产量 方法 | ||
1.一种提高内生真菌发酵产物中紫杉醇产量的方法，其特征在于，包括步骤：
(1)取活化后的产紫杉醇内生真菌菌种接种到液体MRS培养基中培养4h-6h，离心收集第一菌体；将第一菌体悬浮在含胆盐的液体MRS培养基中于20℃-30℃孵育3h-40h，离心收集第二菌体；将第二菌体经PBS缓冲液清洗干净后重新悬浮于液体MRS培养基中，震荡摇匀，在20℃-30℃培养2天-10天，得到产紫杉醇内生真菌种子液；
(2)将步骤(1)的产紫杉醇内生真菌种子液接入内生真菌固态发酵培养基中，在16℃-30℃培养3天-30天，然后置于交变磁场环境中再培养5天-20天，培养产物经真空冷冻干燥、粉碎后得内生真菌固态发酵产物；所述内生真菌固态发酵培养基中含有曼地亚红豆杉和蜘蛛香；
(3)将步骤(1)的产紫杉醇内生真菌种子液接入液体发酵培养基中，调pH值为3-7，在15℃-25℃培养5天-25天，离心，得到内生真菌发酵终产物；所述液体发酵培养基中含有内生真菌固态发酵产物。
2.根据权利要求1所述的提高内生真菌发酵产物中紫杉醇产量的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述内生真菌固态发酵培养基每1L中含有2.0g-8.0g曼地亚红豆杉和0.5g-2.5g蜘蛛香。
3.根据权利要求1所述的提高内生真菌发酵产物中紫杉醇产量的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述液体发酵培养基每1L中含有0.2g-1g内生真菌固态发酵产物。
4.根据权利要求1所述的提高内生真菌发酵产物中紫杉醇产量的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述含胆盐的液体MRS培养基中胆盐的质量百分含量为0.1％-0.5％。
5.根据权利要求1所述的提高内生真菌发酵产物中紫杉醇产量的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述第一菌体与用于悬浮第一菌体的含胆盐的液体MRS培养基的体积比为1:1-3，第二菌体与用于悬浮第二菌体的液体MRS培养基的体积比为1:1-3。
6.根据权利要求1所述的提高内生真菌发酵产物中紫杉醇产量的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述交变磁场环境中磁场强度为0.2mT-6mT，磁场频率为3Hz-40Hz。
7.根据权利要求1所述的提高内生真菌发酵产物中紫杉醇产量的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述产紫杉醇内生真菌种子液的接入量为内生真菌固态发酵培养基体积的5％-25％。
8.根据权利要求1所述的提高内生真菌发酵产物中紫杉醇产量的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述产紫杉醇内生真菌种子液的接入量为液体发酵培养基体积的3％-20％。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于浙江省林业科学研究院，未经浙江省林业科学研究院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201511027713.8/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
