[发明专利]可利霉素生物合成基因簇有效
申请号: | 201511028754.9 | 申请日: | 2015-12-31 |
公开(公告)号: | CN105505954B | 公开(公告)日: | 2019-01-22 |
发明(设计)人: | 王以光;姜洋;赵小峰;赫卫清;戴剑漉 | 申请(专利权)人: | 沈阳福洋医药科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/52 | 分类号: | C12N15/52 |
代理公司: | 北京华科联合专利事务所(普通合伙) 11130 | 代理人: | 杨厚;王为 |
地址: | 110164 辽宁省*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 霉素 生物 合成 基因 | ||
1.一种可利霉素生物合成基因簇,其特征是,所述生物合成基因簇共有44个基因,具体为:
1)聚酮合酶基因orf10-14,共5个基因;
2)与聚酮合成延长单位及修饰相关的基因orf1、orf4-6、15、36-39,共有9个基因;
3)与糖基合成相关基因orf9、16-22、24、26、28、29、33-35、41,共16个基因;
4)与糖基转移相关基因orf7、8、30-32、40,共6个基因;
5)与抗性相关基因orf3和25,共2个基因;
6)与生物合成调控相关基因orf 2、23、27、42,共4个基因;
7)外源引入的基因工程菌标记基因orf43和与之连锁的碳霉糖4”O-羟基异戊酰转移酶基因orf44,共2个基因;
其中,上述的核苷酸序列分别选自Seq.1中的orf1(1-645)、orf2(1810-1208)、orf3(3133-2285)、orf4(3614-4840)、orf5(4846-5511)、orf6(7150-5801)、orf7(8444-7179)、orf8(9729-8482)、orf9(10543-9830)、orf10(16215-10543)、orf11(21076-16328)、orf12(32511-21124)、orf13(38599-32585)、orf14(52259-38643)、orf15(53099-54310)、orf16(54495-54845)、orf17(54842-56041)、orf18(56038-56946)、orf19(56930-57967)、orf20(57937-60174)、orf21(60836-61984)、orf22(62796-62077)、orf23(63633-65645)、orf24(67379-66318)、orf25(69004-67352)、orf26(69349-70650)、orf27(72156-70708)、orf28(72422-73462)、orf29(74601-73561)、orf30(74913-76160)、orf31(76218-77486)、orf32(77606-78781)、orf33(78783-79775)、orf34(79772-80779)、orf35(82055-80823)、orf36(83164-82052)、orf37(84400-83279)、orf38(84713-84393)、orf39(85576-84710)、orf40(85825-87042)、orf41(87094-87702)、orf42(89315-88143);且orf43和orf44与Seq1.不连锁。
2.如权利要求1所述生物合成基因簇,其特征是,所述的5个聚酮合酶基因编码催化可利霉素16元内酯环聚酮体生物合成酶,即orf10-14的核苷酸序列或互补序列及其相应的氨基酸序列,即IA-W10、IA-W11、IA-W12、IA-W13和IA-W14。
3.如权利要求1或2所述的生物合成基因簇,其特征是,5个聚酮合酶包含模块或结构域,即酮基合成酶(KS)、酰基转移酶(AT)、酮基还原酶(KR)、脱水酶(DH)、烯酰基还原酶(ER)、酰基载体蛋白(ACP)、硫酯酶结构域的核苷酸序列或互补序列及其相应的氨基酸序列。
4.如权利要求1所述的生物合成基因簇,其特征是,所述聚酮合成延长单位及修饰相关基因orf1、orf4-6、15、36-39的核苷酸序列或互补序列及其相应的氨基酸序列为IA-W1、IA-W4、IA-W5、IA-W6、IA-W15、IA-W36、IA-W37、IA-W38、IA-W39。
5.如权利要求1所述的生物合成基因簇,其特征是,所述糖基合成相关基因orf9、16-22、24、26、28、29、33-35、41的核苷酸序列或互补序列及其相应的氨基酸序列为IA-W9、IA-W16、IA-W17、IA-W18、IA-W19、IA-W20、IA-W21、IA-W22、IA-W24、IA-W26、IA-W28、IA-W29、IA-W33、IA-W34、IA-W35、IA-W41。
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