[发明专利]一种由液体和半固体发酵工艺结合高密度生产解淀粉芽孢杆菌的方法

权利要求书

1.一种由液体和半固体发酵工艺结合高密度生产解淀粉芽孢杆菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：

①液体发酵

将解淀粉芽孢杆菌的种子液接种至液体发酵培养基，接种量为1-5%，在温度为35-38℃，通入空气量为25-35 L/min，压力为0.02-0.04 Mpa的条件下培养20-26 h后获得液体发酵产物，液体发酵过程使用100L机械搅拌发酵罐；

所述液体发酵培养基包括18-22 g/L蔗糖、8-12 g/L豆粕粉、0.8-1.2 g/L酵母粉、1.0-1.4g/L K₂HPO₄和0.8-1.2 g/L MgCl₂；

②半固体发酵

将液体发酵产物接种至半固体发酵培养基并混合均匀，接种量为18-22%，在温度为35-38℃、湿度为50-70%的条件下培养4-6天，获得半固体发酵产物；

所述半固体发酵培养基按重量份计，包括80-100份玉米粉、8-12份大米粉、35-50份椰糠粉、14-17份木薯渣粉和160-200份水。

2.根据权利要求1所述的一种由液体和半固体发酵工艺结合高密度生产解淀粉芽孢杆菌的方法，其特征在于，所述解淀粉芽孢杆菌的种子液浓度为1.2×10¹⁰-5.6×10¹⁰cfu/mL。

3.根据权利要求2所述的一种由液体和半固体发酵工艺结合高密度生产解淀粉芽孢杆菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：

①液体发酵

将解淀粉芽孢杆菌的种子液接种至液体发酵培养基，接种量为3%，在温度为37℃，通入空气量为30 L/min，压力为0.03 Mpa的条件下培养24 h后获得液体发酵产物，液体发酵过程使用100L机械搅拌发酵罐；

所述解淀粉芽孢杆菌的种子液浓度为4.0×10¹⁰ cfu/mL；

所述液体发酵培养基包括20 g/L蔗糖、10 g/L豆粕粉、1.0 g/L酵母粉、1.2g/L K₂HPO₄和1.0g/L MgCl₂；

②半固体发酵

将液体发酵产物接种至半固体发酵培养基并混合均匀，接种量为20%，后在温度为37℃、湿度为60%的条件下培养5天，获得半固体发酵产物；

所述半固体发酵培养基按重量份计，包括90份玉米粉、10份大米粉、40份椰糠粉、15份木薯渣粉和200份水。

4.根据权利要求1-3任一项所述的一种由液体和半固体发酵工艺结合高密度生产解淀粉芽孢杆菌的方法，其特征在于，所述解淀粉芽孢杆菌的种子液由以下方法培养获得：将解淀粉芽孢杆菌接种于LB培养基培养32h-48h，后接种至液体种子培养基培养获得种子液，所述液体种子培养基包括蔗糖20g/L、酵母粉10 g/L、K₂HPO₄ 1.2 g/L、MgCl₂ 1.0 g/L和消泡剂0.2 mL/L。

5.根据权利要求1-3任一项所述的一种由液体和半固体发酵工艺结合高密度生产解淀粉芽孢杆菌的方法，其特征在于，还包括将半固体发酵产物在发酵室里干燥并粉碎，得到终产物。