[发明专利]一种合成Etelcalcetide的方法

说明书

本发明涉及医药合成领域，公开了一种合成Etelcalcetide的方法。所述方法液相合成在SEQ ID NO:1所示氨基酸序列上N末端乙酰化、C末端酰胺化的直链七肽；L‑Cys进行NCS氯化，使巯基上的氢被氯取代，生成L‑Cys(SCl)；直链七肽和L‑Cys(SCl)偶联反应生成二硫化物，获得Etelcalcetide；本发明采用全液相方法合成Etelcalcetide，与固相方法比较使用更少的试剂及溶剂，绿色环保，并且不使用价格高昂的树脂，降低了成本。同时以价廉易得的NCS与半胱氨酸形成活性中间体构建二硫键，避免了传统方法转化率低，纯度低的缺点，利于Etelcalcetide的大规模生产。

技术领域

本发明涉及医药合成领域，具体涉及一种合成Etelcalcetide的方法。

背景技术

继发性甲状旁腺功能亢进(SHPT，简称继发性甲旁亢)，是指在慢性肾功能不全、肠吸收不良综合征、Fanconi综合征和肾小管酸中毒、维生素D缺乏或抵抗以及妊娠、哺乳等情况下，甲状旁腺长期受到低血钙、低血镁或高血磷的刺激而分泌过量的甲状旁腺激素(PTH)，以提高血钙、血镁和降低血磷的一种慢性代偿性临床表现，长期的甲状旁腺增生最终导致形成功能自主的腺瘤。

Etelcalcetide是由Kai Pharmaceuticals,Inc.开发的一种新颖的拟钙剂(calcimimetic agent)，能够抑制甲状旁腺激素(PTH)的分泌。继发性甲旁亢(SHPT)是接受透析治疗的慢性肾脏病(CKD)患者中一种常见且严重的代偿失调疾病。目前已知，持续升高的甲状旁腺激素(PTH)与CKD患者的关键临床结局相关。Etelcalcetide可结合并激活甲状旁腺上的钙敏感受体，实现甲状旁腺激素(PTH)水平的降低。

Etelcalcetide有3个D构型的精氨酸、2个D构型的丙氨酸、1个D构型的精氨酰胺、1个L构型半胱氨酸与1个D构型半胱氨酸(N段被乙酰基封闭)构成，其中D构型半胱氨酸与L构型半胱氨酸以二硫键连接在一起(N-acetyl-D-cysteinyl-D-alanyl-D-arginyl-D-arginyl-D-arginyl-D-alanyl-D-Argininamide,disulfide with L-cysteine)，其结构如下所示：

专利CN201080045024.9首度报道了该化合物，但是未见该化合物的合成工艺报道。该化合物合成的关键在于二硫键的构建，常规的肽合成中使用的构建二硫键的方法包括空气氧化法，碘/醋酸体系氧化法，双氧水氧化法等，这类方法仅适合于环肽的二硫键的构建，环肽的二硫键往往是分子内的两个巯基通过氧化的方法进行连接，需要通过使用极稀溶液来进行反应，减少分子间反应的发生。但是Etelcalcetide需要进行分子间巯基的氧化反应，若按照常规的二硫键构建方法进行反应，将无法得到理想收率和纯度的最终产物。此外，如果以普通的固相合成方法合成该化合物合成，其中的胍基较为容易脱除而形成降解杂质，纯化难度极大。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种合成Etelcalcetide的方法，使得本发明所述方法能够提高Etelcalcetide及中间产物的收率，提高Etelcalcetide纯度和降低杂质。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种合成Etelcalcetide的方法，包括以下步骤：

步骤1、液相合成在SEQ ID NO:1所示氨基酸序列上N末端乙酰化、C末端酰胺化的直链七肽；

步骤2、L-Cys进行NCS氯化，使巯基上的氢被氯取代，生成L-Cys(SCl)；

步骤3、将步骤1合成的直链七肽和L-Cys(SCl)偶联反应生成二硫化物，获得Etelcalcetide；

步骤1和步骤2不分先后。