[发明专利]分离淋巴细胞的分离方法

权利要求书

1.一种分离淋巴细胞的分离方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：将符合药用标准的右旋糖酐3～5重量份，海藻糖2～4重量份，超低粘度海藻酸钠0.3～0.8重量份，泛影葡胺1～3重量份，聚二烯丙基二甲基氯化铵0.1～0.15重量份充分溶解于灭菌水配制成100重量份的生理溶液，再经过滤膜过滤除菌得到分离液；

步骤2：将所述分离液加入离心管中，所述分离液的体积不大于离心管体积的1/2；

步骤3：将抗凝剂处理过的样品经平衡盐溶液或无血清培养基稀释后铺在所述分离液上，在8-25℃，200g-800g，10～30min条件下离心；

所述样品的来源为外周血、脐带血或骨髓。

2.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述步骤1为：将符合药用标准的右旋糖酐3.5～4.5重量份，海藻糖2.5～3.5重量份，超低粘度海藻酸钠0.4～0.8重量份，泛影葡胺1.5～2.5重量份，聚二烯丙基二甲基氯化铵0.12～0.15重量份充分溶解于灭菌水配制成100重量份的生理溶液，再经过超滤膜过滤除菌得到分离液。

3.根据权利要求2所述的分离方法，其特征在于，所述步骤1为：将符合药用标准的右旋糖酐4重量份，海藻糖3重量份，超低粘度海藻酸钠0.7重量份，泛影葡胺2重量份，聚二烯丙基二甲基氯化铵0.13重量份充分溶解于灭菌水配制成100重量份的生理溶液，再经过超滤膜过滤除菌得到分离液。

4.根据权利要求1至3任一所述的分离方法，其特征在于，所述分离液的密度为1.070～1.090g/cm³，渗透压为275～300smol/kg，pH为6～9，粘度为3.0～5.0cp。

5.根据权利要求4所述的分离方法，其特征在于，所述步骤1中的灭菌水为灭菌注射用水。

6.根据权利要求4所述的分离方法，其特征在于，所述右旋糖酐为Dextran70。

7.根据权利要求6所述的分离方法，其特征在于，所述步骤1中的滤膜为灭菌的0.22μm滤膜。

8.根据权利要求7所述的分离方法，其特征在于，所述步骤3的稀释比例为1:2-2:1。

9.根据权利要求8所述的分离方法，其特征在于，所述步骤3的稀释比例为1:1-1.5:1。