[发明专利]毛竹转录因子NAC基因CDS序列的应用在审

专利信息
申请号: 201511032583.7 申请日: 2015-12-31
公开(公告)号: CN105463015A 公开(公告)日: 2016-04-06
发明(设计)人: 高志民;王丽丽;赵韩生;孙化雨;李利超 申请(专利权)人: 国际竹藤中心
主分类号: C12N15/84 分类号: C12N15/84;C12N15/29;A01H5/00
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 王文君
地址: 100102 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 毛竹 转录 因子 nac 基因 cds 序列 应用
【说明书】:

技术领域

发明涉及基因工程领域,具体地说,涉及毛竹转录因子NAC基因CDS序列的应用。

背景技术

NAC(NAM/ATAF/CUC)转录因子家族是植物特有的一类转录因子,多数NAC蛋白的N端具有高度保守的NAC结构域,而在C端则具有多元化的激活域。NAC转录因子广泛参与调控许多生物学过程,如细胞分裂、细胞次生壁合成、器官边界、开花和衰老等植物生长发育过程,以及参与调控植物对高盐、干旱、低温等非生物逆境胁迫响应过程。在拟南芥中过量表达ANAC019、ANAC055、RD26/ANAC072和ATAF1/ANAC002均能提高其抗旱能力;过量表达ATAF2/ANAC081的植物更容易感染枯萎病菌;过量表达JUB1/ANAC042和VNI2/ANAC083能够延迟植物衰老,提高对非生物胁迫的耐受能力。在水稻中过量表达OsNAC5、OsNAC9和OsNAC10能够显著扩大根系的分布范围,从而提高抗旱能力实现高产;过量表达OsNAC5提高其抗旱、耐盐的能力;SNAC1转入水稻和小麦,能够提高转基因植株抵抗多种非生物胁迫的能力。

竹子是仅次于木材的第二大森林资源,竹产业是我国林业四大朝阳产业之一,竹子已经被广泛应用于建筑、家具、造纸、装饰材料、食品保健、园林景观、生态修复等领域,是最具潜力的绿色资源之一。竹子以其生长速度快,繁殖能力强,一次造林,永续利用,适宜山地造林的特点,在我国造林宜林地日趋减少的情况下,竹林优势更为明显。尤其是目前我国天然林商业采伐全面禁止的情况下,竹资源的开发利用在保障我国木材安全、生态安全以及贫困山区农民脱贫致富和新农村建设中具有不可替代的作用。毛竹(Phyllostachysedulis)是我国最为重要的笋、材两用经济竹种,现有面积443万公顷,2014年年产毛竹13.08亿根,为弥补我国木材缺口做出了积极贡献。以毛竹为材料进行NAC转录因子研究,对于更好地开发利用毛竹基因资源,开展抗逆分子育种具有重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的是提供毛竹转录因子NAC基因CDS序列的应用。

为了实现本发明目的,本发明提供毛竹转录因子NAC基因CDS序列在促进植物侧根生长发育中的应用。

本发明所述的毛竹转录因子NAC基因CDS序列为:

i)SEQIDNO:1所示的核苷酸序列;或

ii)SEQIDNO:1所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个核苷酸且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列;或

iii)在严格条件下与SEQIDNO:1所示序列杂交且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列,所述严格条件为在含0.1%SDS的0.1×SSPE或含0.1%SDS的0.1×SSC溶液中,在65℃下杂交,并用该溶液洗膜;或

iv)与i)、ii)或iii)的核苷酸序列具有90%以上同源性且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列。

前述的应用,其是将毛竹转录因子NAC基因CDS序列构建到植物双元表达载体上,转化植物,从而促进转基因植株侧根生长发育。

本发明述及的植物双元表达载体包括pCAMBIA1301、改造的pCAMBIA1301等;其中,所述改造的pCAMBIA1301是在载体pCAMBIA1301的多克隆位点引入花椰菜花叶病毒35S启动子和胭脂碱合酶终止子。

携带有目的片段的表达载体可通过使用Ti质粒、植物病毒载体、直接DNA转化、微注射、电穿孔等常规生物技术方法导入植物细胞中(Weissbach,1998,MethodforPlantMolecularBiologyVIII,AcademyPress,NewYork,第411-463页;Geiserson和Corey,1998,PlantMolecularBiology,2ndEdition)。

本发明还提供毛竹转录因子NAC基因CDS序列在提高植物对非生物逆境胁迫的耐受能力中的应用,所述非生物逆境胁迫包括高盐、干旱等。

前述的应用,其是将毛竹转录因子NAC基因CDS序列构建到植物双元表达载体上,转化植物,从而提高转基因植株对非生物逆境胁迫的耐受能力。

本发明所述的植物包括但不限于拟南芥。将毛竹转录因子NAC基因CDS序列构建到改造的载体pCAMBIA1301上,转化野生型拟南芥,从而提高转基因拟南芥植株的耐盐、抗旱能力。

本发明优选采用农杆菌转化法转化植物。

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