[发明专利]一种乙脑假病毒及其制备方法有效
申请号: | 201511033119.X | 申请日: | 2015-12-31 |
公开(公告)号: | CN105602991B | 公开(公告)日: | 2020-06-02 |
发明(设计)人: | 曹三杰;文心田;刘瀚扬;伍锐;黄小波;文翼平;袁磊;冯瑶;周玉鹏;曹玉琴 | 申请(专利权)人: | 四川农业大学 |
主分类号: | C12N15/867 | 分类号: | C12N15/867;C12N7/01;C12N1/21;C12R1/93;C12R1/19 |
代理公司: | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人: | 李高峡;张娟 |
地址: | 611130 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 乙脑 病毒 及其 制备 方法 | ||
1.一种重组载体,其特征在于:它是中国典型培养物保藏中心保藏的保藏号为CCTCCNO:M 2015570的重组菌DH5α/pcDNA3.1-SPME携带的重组质粒pcDNA3.1-SPME。
2.一种制备乙脑假病毒的试剂盒,其特征在于,它是由权利要求1所述的重组质粒pcDNA3.1-SPME和慢病毒包装质粒组成。
3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于:它还包括宿主细胞。
4.根据权利要求2或3所述的试剂盒,其特征在于:
所述慢病毒包装质粒为 pCDH-CMV-Luc–copGFP和psPAX2.1;
所述宿主细胞为HEK 293T细胞。
5.权利要求2-4任意一项所述的试剂盒在制备乙脑假病毒中的用途。
6.一种乙脑假病毒的制备方法,其特征在于:它包括如下步骤:
a. 将权利要求1所述的重组质粒pcDNA3.1-SPME和慢病毒包装质粒共转染宿主细胞;
b.培养宿主细胞48h;
c.收获细胞培养的上清液,即得乙脑假病毒。
7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述慢病毒包装质粒为 pCDH-CMV-Luc–copGFP和psPAX2.1;所述宿主细胞为293T细胞;所述转染采用阳离子脂质体法转染;转染时pCDH-CMV-Luc–copGFP、psPAX2.1、pcDNA3.1-SPME的重量比为4:3:2。
8.权利要求6或7所述制备方法得到的乙脑假病毒。
9.权利要求8所述的乙脑假病毒在非诊断目的的乙脑病毒中和抗体研究或乙脑药物筛选中的用途。
10.一种重组菌,其特征在于:它是由中国典型培养物保藏中心保藏的保藏号为CCTCCNO:M 2015570的重组菌DH5α/pcDNA3.1-SPME。
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