[实用新型]快速检测牛流行热病毒的试纸条

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种在检测病毒情况下使用的试纸。更具体地说，本实用新型涉及一种用在检测病毒情况下的快速检测牛流行热病毒的试纸条。

背景技术

牛流行热(bovine ephemeral fever，BEF)是由牛流行热病毒(bovine ephemeral fever virus，BEFV)引起的一种急性热性传染病。其特征是突发高热、呼吸迫促、消化机能障碍、全身虚弱、僵硬、跋行或瘫痪、奶牛产奶量降低、乳品质下降，部分怀孕母牛流产，并且传播迅速，流行面广，给养牛业造成重要经济损失。

BEF首先发现于19世纪中期东非，随后流行于非洲、亚洲和大洋洲许多国家和地区，在我国多个省份多次爆发流行。本病严重影响乳牛的产乳量，且部分病牛因瘫痪而淘汰，极大影响了养牛业的健康发展。

及时、快速诊断BEF，是有效控制BEF的前提。目前BEF的诊断主要有常规实验室检测和分子生物学两大类方法。常规方法主要有病毒分离鉴定和BEFV抗体的血清学检测，包括血清中和试验和ELISA等方法。分子生物学方法主要有RT-PCR和核酸探针技术等。但BEFV的病毒分离培养、血清中和试验、ELISA、PCR和核酸探针等检测技术操作复杂，需要昂贵的仪器设备、过程较长、耗时费力，需要特定仪器设备和专业技术人员操作，很难在基层普及，不能满足生产一线或疫病现场的快速诊断需要。因此，研究一种快速检测禽牛流行热病毒感染的检测技术非常重要而迫切。

实用新型内容

本实用新型的一个目的是解决至少上述问题和/或缺陷，并提供至少后面将说明的优点。

本实用新型还有一个目的是提供一种可快速检测牛流行热病毒的试纸条，其利用微孔滤膜的渗滤浓缩和毛细管作用，将抗原-抗体反应由ELISA的传统液相环境转到固相滤膜上快速进行，采用胶体金印迹代替酶印迹，凭肉眼直接观察胶体金的显色状况，即时获得检测结果。

本实用新型还有一个目的是提供一种检测特异性强的快速检测牛流行热病毒的试纸条，胶体金标对单抗/多抗的特异性和亲和力(结合力)影响很小，具有较高的印迹率、特异性和敏感性，可检测到2纳克的相应病毒的蛋白。

为了实现根据本实用新型的这些目的和其它优点，提供了一种快速检测牛流行热病毒的试纸条，其特征在于，包括：

支撑层、吸附纤维层、金标抗体纤维层、纤维素膜层及吸水层，其中吸附纤维层、金标抗体纤维层、纤维素膜层及吸水层顺次搭接粘贴在支撑层上；

牛流行热病毒抗体的检测印迹线，其为包被的抗牛流行热病毒的单克隆抗体或多克隆抗体检测印迹线且设置在所述纤维素膜层上；

羊抗鼠免疫球蛋白G或兔抗鼠免疫球蛋白G的对照印迹线，其为包被的抗牛流行热病毒的多克隆抗体或单克隆抗体对照印迹线且设置在所述纤维素膜层上，且与所述牛流行热病毒抗体的检测印迹线定距间隔排列；

其中，所述金标抗体纤维层上附着有与牛流行热病毒抗体的检测印迹线对应的以胶体金标记的牛流行热病毒单克隆抗体或多克隆抗体。

优选的是，其中，在所述吸附纤维层、金标抗体纤维层以及吸水层上敷设有保护膜，且在所述吸附纤维层与金标抗体纤维层交界处对应的保护膜上偏向所述吸附纤维层一侧0.3～0.7cm处印制有样品标记线。

优选的是，其中，所述牛流行热病毒抗体的检测印迹线与所述羊抗鼠免疫球蛋白G或兔抗鼠免疫球蛋白G的对照印迹线的排列组合为“‖”、“//”、“++”、中的一种。 

优选的是，其中，所述纤维素膜层由硝酸纤维素膜、纯纤维素膜、羧化纤维素膜或聚偏二氟乙烯膜制成。

优选的是，其中，所述吸附纤维层由玻璃棉、尼龙纤维或聚酯纤维制成。

优选的是，其中，所述支撑层由不吸水的硬质塑胶片或硬纸条制成。

优选的是，其中，所述吸水层用吸水纸制成。

优选的是，其中，所述金标抗体纤维层由玻璃棉、尼龙纤维或聚酯纤维制成。

优选的是，其中，所述牛流行热病毒抗体的检测印迹线设置在所述纤维素膜层且靠近所述金标抗体纤维层的一端。

本实用新型至少包括以下有益效果：

1、根据ELISA的基本原理，用免疫层析试纸检测病毒，利用微孔滤膜的渗滤浓缩和毛细管作用，将抗原-抗体反应由ELISA的传统液相环境转到固相滤膜上快速进行，并采用胶体金印迹代替酶印迹，凭肉眼直接观察胶体金的显色状况，即时获得检测结果，因此该方法比ELISA等血清学方法更为简便、快速；