[实用新型]一种制作细胞块的专用离心管

说明书

技术领域

本实用新型属于细胞病理学领域，具体涉及一种从细胞病理学和外科病理学标本中制作细胞块的专用离心管。

背景技术

细胞病理学通过分析细胞或者小的细胞团诊断多种疾病和评估健康状况。

最常用的细胞病理学技术是细胞涂片（papsmear）。细胞涂片是将细胞或小的细胞团涂布于玻片上，用诊断试剂染色后，在显微镜下观察细胞形态从而对多种疾病做出诊断或者评估健康状况。细胞涂片方法有明显的局限性，主要表现在：细胞涂片不能复制，一旦细胞涂片用一种诊断试剂染色以后，难以同时再进行另外的染色和检测；难以进行免疫组化和分子病理等检测；血液、蛋白沉淀物、粘液干扰以及细胞堆积等因素使细胞的形态和结构不清楚；细胞在制片过程中因受力扭曲变形难于判读；不能长期保存等。

细胞蜡块（cellblock）是将检测细胞经过脱水、石蜡包埋等程序后制作而成。细胞蜡块经切割制作成细胞切片，进一步染色后对细胞进行检测。与细胞涂片相比，细胞蜡块有许多优点：细胞不变形，结构清楚，易于观察判读；能够像活检组织切片那样清楚观察细胞的排列，因此，也被称作微活检；细胞块能够切出多张细胞或小细胞团的切片进行分析；易于进行特殊染色、免疫细胞化学染色以及分子病理检测等；能够长期保存，供进一步诊断和研究用。

有许多种方法制作细胞蜡块，传统的方法是用普通的离心管离心沉淀以后，倾倒去上清液，然后取出沉渣，再用常规病理技术方法制作成细胞蜡块。也有一些方法对传统方法进行改进。但这些现有的方法都有不同的缺陷，其中最明显的缺陷是：不适于在细胞或细胞团数量少的情况下制备细胞块，因此，临床上的有一部分标本因细胞数量少而无法制作成细胞蜡块，不能对患者做出明确诊断；另外，目的细胞（病变细胞）在细胞蜡块中的位置分散而不确定，切片时难以切割到病变细胞，或者细胞在切片上的分布面小，密度低；蜡块大小、形状不规则等。

发明内容

本实用新型提供了一种制作细胞块的专用离心管和方法。

一种制作细胞块的专用离心管，由离心管和两个离心管盖构成。离心管是两端开口，圆柱形中空管，离心管两端的外表层带有外螺纹。离心管盖是密封型盖，平底（细胞分布在一个平面上的结构基础），底部有密封圈（垫），内侧壁表层设有内螺纹，能够与离心管两端外螺纹拧紧咬合，防止液体渗出，形成密闭的圆柱形空间。设计成一组内外径不相同的离心管，离心管内径从1~15mm，外径一般在不超过20mm范围内变化；可以根据需要设计成不同长度，通常60~80mm比较合适。管壁厚度1~2mm。不同规格离心管能够满足不同细胞数量制作细胞块的需要，内径2~5mm的离心管特别适用于临床微量细胞标本或者分离、培养获得的微量细胞制作细胞块。管壁厚度可以根据需要增加，以达到增强保温效果的目的，能够使基质较长时间在室温中保持液态。大离心管和小离心管能够套叠在一起，在操作和离心时，大离心管作为小离心管的支架，能够使小离心管保持直立。离心管由玻璃或透明塑料制成，瓶盖由透明塑料制成，便于对离心后细胞所处位置和基质情况进行观察。

与该专用离心管配合使用的是细胞基质材料，许多种物质可以作为细胞基质，其中在分子生物学中常用的低熔点琼脂糖能够作为该方法有效的细胞基质。选用熔点高于石蜡的熔点、凝胶温度接近室温的低熔点琼脂糖。这样，在将细胞块制作成细胞蜡块的过程中，即在脱水、透明、浸蜡、包埋等过程中细胞块不会熔化；凝胶温度接近室温，熔化基质余热能够使基质在室温中长时间处于液态，在离心过程中无需另外加热，离心才能够有效将细胞富集到一个平面上。低熔点琼脂糖的熔点温度在60~65℃，凝胶温度在15~35℃最为合适。过高的凝胶温度，则需要在离心过程中使用加热或保温措施，防止液态基质凝固成固态，使方法变得复杂。

以专用离心管和基质材料能够方便地制作细胞块。现在以低熔点琼脂糖作为细胞基质材料为例子加以说明。将低熔点琼脂糖用pH=7.4的磷酸盐缓冲液配制成1%的琼脂糖（常用的浓度为1%~3%），加热完全溶解后，取内径为5mm的离心管，直立在桌面或者离心管架上，拧下上端的离心管盖，将基质分装到离心管中，每管1mL，拧上离心管盖。装有基质的离心管可以在4°冰箱中长期保存备用。基质的使用量是根据细胞数量多少和选择的离心管规格确定，细胞数量多时应该适当增加细胞基质材料的使用量。

制作细胞块时，将带基质材料的离心管放入烤片机中，温度调至高于基质的熔点温度（如70℃）以上，加热20分钟以上，使固态的基质变成液态。室温较低时，应该增加熔化基质的温度（如80℃），以便在室温中基质有较长的时间不会凝固，能够从容操作和离心。