[实用新型]高效的血小板蛋白一步法快速检测试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型属于生物检测试剂盒技术领域，具体涉及一种高效的血小板蛋 白一步法快速检测试剂盒。

背景技术

出血性疾病在临床上是一种非常常见的疾病，如果得不到及时确诊治疗， 则可能导致剧烈疼痛、严重关节损伤以及致命的内出血从而导致死亡，而全世 界仅有30％的出血性疾病患者得到了确诊。免疫性血小板减少症(ITP)是临床 最为常见的出血性疾病，约占出血性疾病总数的30％，欧美国家年发病率为 5-10/10万人口。可发生在任何年龄阶段，分急性及慢性俩种，急性多见于儿童， 慢性多见于成人，以40岁以下女性常见，65岁以上老年发病率呈上升趋势。临 床表现以皮肤的瘀点及瘀斑，粘膜及内脏出血为特征。根据2010年世界血友联 盟调查数据显示ITP患病率约为千分之一，中国约有150万患者。ITP是由机体 免疫系统功能紊乱引起血小板破坏增加，从而导致血小板数目减少的自身免疫 性出血性疾病，主要是由于血小板特异性自身抗体介导的血小板破坏引起的血 小板数量减少，故血小板特异性自身抗体的检测对ITP的诊断有重要的临床应 用价值。

实用新型内容

本实用新型的目的是提供一种高效的血小板蛋白一步法快速检测试剂盒， 可快速检测五种血小板蛋白，灵敏度高、特异性好、漏诊率低，操作简单方便。

为实现上述目的，本实用新型所采用的技术方案是：一种血小板蛋白GPⅨ 一步法快速检测试剂盒，其特征在于：包括盒体和盖体，盖体从盒体开口的一 侧密封盒体，盖体上设有观察窗和加样孔，观察窗分为测试T区和质控C区， 盒体内容置有一检测带，检测带上设有检测线T线和质控线C线，检测线T线 与测试T区位置对应，质控线C线与质控C区位置对应，检测线T线处包被有 抗GPⅨ单克隆抗体的微球、抗GPⅠb单克隆抗体的微球、抗GPⅡb单克隆抗 体的微球、抗GPⅢa单克隆抗体的微球和抗GMP-140单克隆抗体的微球，质控 线C线处包被有FITC标记的羊抗人多克隆抗体。

优选的，所述盒体与盖体采用搭扣的方式扣合。

优选的，所述盒体呈方形，盖体的形状与盒体的形状相适应。

优选的，所述盖体的圆弧形的一端设有便于捏持的凸纹。

优选的，所述盒体的一外侧壁上设有名片卡位槽。

优选的，所述微球的材质为聚苯乙烯。

其中，流式微球技术(cytometricbeadarray，CBA)是基于流式细胞术发展起 来的新技术，它以聚苯乙烯微球为反应界面，利用特异性单克隆抗体包被后即 可俘获一些小分子物质，通过检测微球的“放大”作用对这些小分子物质进行 检测。近年来，CBA正越来越多的应用于血清、血浆、培养细胞上清、眼泪或 房水等各种液相中可溶性蛋白及细胞因子的检测。

血小板特异性自身抗体介导的血小板破坏是经典的ITP发病机制。约50％～ 60％的ITP患者血小板表面结合有IgG型自身抗体，可识别血小板表面的1种 或多种GP，包括GPⅡb/Ⅲa,GPⅠb/Ⅸ,Ⅰa/Ⅱa,Ⅳ,Ⅴ等。其中约75％的血小板 抗体都位于血小板膜GPⅡb/Ⅲa,GPⅠb/Ⅸ复合体上。血小板自身抗体引起血小 板破坏加速的可能机制：自身抗体结合在血小板上，一方面抗体分子的Fc段与 巨噬细胞的Fc受体(FcR)结合，导致血小板被吞噬破坏；另一方面抗原抗体复合 物可激活补C1q，随后补体系统各成分相继被激活，C3裂解产物C3b附着于血 小板表面，并与巨噬细胞的C3b受体结合，也导致血小板吞噬破坏。个别患者 血小板自身抗体不仅导致血小板破坏，还可能引起血小板功能异常。

包被抗GPⅨ(单抗SZ1)、GPⅠb(单抗SZ2)、抗GPⅡb(单抗SZ22)、抗 GPⅢa(单抗SZ21)、抗GMP-140(单抗SZ51)单克隆抗体的微球可捕获血小板特 异性抗原抗体复合物，在加入FITC标记的羊抗人多克隆抗体后，流式细胞仪上 检测平均荧光强度值(Meanfluorescenceintensity,MFI)可反映患者血小板糖蛋白 特异性自身抗体情况，从而实现ITP的诊断。

上述单克隆抗体微球的制备过程如下：

(a)微球的制备：采用微乳聚合法制备粒径为50-1000nm的聚苯乙烯微球， 所述微球表面带有羧基、氨基、醛基、溴乙酰基、碘乙酰基、硫醇基和环氧基 中的一种或多种或不带基团；