[发明专利]从溶液去除乳糖的方法

权利要求书

1.一种从包含乳糖的溶液去除乳糖的方法，所述方法包括下述步骤：

a.向包含所述乳糖的溶液中添加一种或多种其上固定有β-半乳糖苷酶的蛋白质功能化的磁性纳米颗粒，所述β-半乳糖苷酶含有至少一个突变，所述突变使所述β-半乳糖苷酶的乳糖水解活性相对于野生型β-半乳糖苷酶下降；

b.使所述磁性纳米颗粒上的所述蛋白质结合所述溶液中的乳糖；以及

c.将所述磁性纳米颗粒从所述溶液磁力分离，从而去除与所述磁性纳米颗粒上的所述蛋白质结合的所述乳糖。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述β-半乳糖苷酶能够水解乳糖，但是以比野生型β-半乳糖苷酶更低的速度。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述乳糖被从所述溶液去除而不被水解。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其中在所述β-半乳糖苷酶已经水解了小部分乳糖之后，从所述溶液中去除所述磁性纳米颗粒。

5.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述β-半乳糖苷酶为大肠杆菌β-半乳糖苷酶。

6.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述突变为Glu537突变。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述突变为E537D突变。

8.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述溶液的甜度由于去除所述乳糖基本上不升高或下降。

9.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述包含乳糖的溶液为牛奶或乳制品。

10.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述β-半乳糖苷酶在N-端或C-端或在N-端或C-端附近含有亲和性标签。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述亲和性标签选自由下述组成的组：多聚组氨酸标签(His-tag)、谷氨酰胺转氨酶、谷胱甘肽S-转移酶、FLAG、生物素、结合麦芽糖的蛋白质、糖蛋白和半胱氨酸介导的定点突变产物。

12.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述磁性纳米颗粒具有涂层。