[发明专利]工程化嵌合聚乙二醇化ADI和使用方法

权利要求书

1.一种重组嵌合精氨酸脱亚胺酶，其包含源自第一微生物的精氨酸脱亚胺酶蛋白的催化结构域和源自第二微生物的精氨酸脱亚胺酶蛋白的α-螺旋结构域，其中所述重组嵌合精氨酸脱亚胺酶由SEQ ID NO:55、56、35、58、34或59中的任一个所示的氨基酸序列或与其具有至少95％同一性的变体组成。

2.根据权利要求1所述的重组嵌合精氨酸脱亚胺酶，其中至少一个赖氨酸残基已经通过氨基酸取代修饰。

3.根据权利要求1所述的重组嵌合精氨酸脱亚胺酶，其经由生物相容性接头与一个或多个聚乙二醇分子键合。

4.根据权利要求3所述的重组嵌合精氨酸脱亚胺酶，其中所述聚乙二醇的总重均分子量为1,000至40,000。

5.根据权利要求3所述的重组嵌合精氨酸脱亚胺酶，其中所述生物相容性接头包含琥珀酰基、酰胺基、酰亚胺基、氨基甲酸基、酯基、环氧基、羧基、羟基、碳水化合物、酪氨酸基团、半胱氨酸基团、组氨酸基团、亚甲基或其组合。

6.根据权利要求5所述的重组嵌合精氨酸脱亚胺酶，其中所述琥珀酰基的来源是琥珀酰亚胺琥珀酸酯。

7.一种多核苷酸，其编码根据权利要求1-2中任一项所述的重组嵌合精氨酸脱亚胺酶。

8.一种载体，其包含根据权利要求7所述的多核苷酸。

9.一种分离的宿主细胞，其包含根据权利要求8所述的载体。

10.一种组合物，其包含根据权利要求1-6中任一项所述的重组嵌合精氨酸脱亚胺酶和生理上可接受的载体。

11.权利要求10的组合物在制备用于治疗癌症、改善其症状或抑制其进展的药物中的用途。

12.根据权利要求11所述的用途，其中所述癌症选自由以下组成的组：黑素瘤、胰腺癌、前列腺癌、小细胞肺癌、间皮瘤、淋巴瘤、肝细胞瘤、肉瘤、白血病、乳腺癌、卵巢癌、结肠直肠癌、胃癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、肾癌、膀胱癌、子宫癌、食道癌、脑癌、头颈癌、宫颈癌和睾丸癌。

13.根据权利要求2所述的重组嵌合精氨酸脱亚胺酶，其中至少5个赖氨酸残基已经通过氨基酸取代修饰。

14.根据权利要求2所述的重组嵌合精氨酸脱亚胺酶，其中至少10个赖氨酸残基已经通过氨基酸取代修饰。

15.根据权利要求2所述的重组嵌合精氨酸脱亚胺酶，其中至少15个赖氨酸残基已经通过氨基酸取代修饰。

16.根据权利要求2所述的重组嵌合精氨酸脱亚胺酶，其中至少20个赖氨酸残基已经通过氨基酸取代修饰。

17.根据权利要求3所述的重组嵌合精氨酸脱亚胺酶，其经由生物相容性接头与1至10个聚乙二醇分子键合。

18.根据权利要求3所述的重组嵌合精氨酸脱亚胺酶，其经由生物相容性接头与5±3个聚乙二醇分子键合。

19.根据权利要求4所述的重组嵌合精氨酸脱亚胺酶，其中所述聚乙二醇的总重均分子量为10,000至30,000。

20.根据权利要求12所述的用途，其中所述白血病选自由以下组成的组：淋巴细胞性白血病、慢性骨髓细胞性白血病、急性髓性白血病。

21.根据权利要求20所述的用途，其中所述急性髓性白血病为复发急性髓性白血病。

22.根据权利要求12所述的用途，其中所述脑癌选自由以下组成的组：神经胶质瘤和多形性成胶质细胞瘤。