[发明专利]微生物麦角硫因生物合成

权利要求书

1.用于生产麦角硫因的工程改造的宿主细胞，其中，所述工程改造的宿主细胞用编码SEQ ID NO:2的氨基酸序列的核酸序列、编码SEQ ID NO:4的氨基酸序列的核酸序列、编码SEQ ID NO:6的氨基酸序列的核酸序列和编码SEQ ID NO:8的氨基酸序列的核酸序列转化，其中所述宿主细胞是大肠杆菌(Escherichia coli)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)或巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)。

2.权利要求1的工程改造的宿主细胞，其中所述宿主细胞是大肠杆菌(Escherichia coli)细胞。

3.权利要求1的工程改造的宿主细胞，其中所述宿主细胞选自酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)细胞和巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)细胞。

4.生产麦角硫因的方法，所述方法包括：

培养权利要求1-3中任一项的宿主细胞；

诱导所述宿主细胞以表达编码EgtB的核酸序列、编码EgtC的核酸序列、编码EgtD的核酸序列和编码EgtE的核酸序列；和

收集麦角硫因。

5.权利要求4的方法，其中在培养宿主细胞期间，向培养物中添加选自组氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、γ-谷氨酰半胱氨酸及其组合的底物。

6.权利要求4的方法，其中在培养宿主细胞期间，向培养物中添加铁(II)。

7.权利要求4的方法，其中所述宿主细胞是大肠杆菌细胞。

8.权利要求4的方法，其中所述宿主细胞选自酿酒酵母细胞和巴斯德毕赤酵母细胞。

9.用于生产麦角硫因的表达载体，其包含编码选自EgtB、EgtC、EgtD和EgtE的氨基酸序列的核酸序列，其中所述核酸序列编码选自以下的氨基酸序列：SEQ ID NO:2的氨基酸序列；SEQ ID NO:4的氨基酸序列；SEQ ID NO:6的氨基酸序列；和SEQ ID NO:8的氨基酸序列。