[发明专利]用于治疗溶酶体贮积症的腺伴随病毒载体

权利要求书

1.一种重组AAV9载体，其包含

（i）编码N-乙酰葡糖胺糖苷酶α的核苷酸序列，其中所述的编码N-乙酰葡糖胺糖苷酶α的核苷酸序列选自SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 19或SEQ ID NO: 22，以及

（ii）与之连接的CAG启动子SEQ ID NO: 4。

2.一种质粒，其包含编码N-乙酰葡糖胺糖苷酶α的核苷酸序列以及与之连接的CAG启动子,其中所述的质粒选自以下质粒：

登录号为DSM 26626的pAAV-CAG-cohNaglu，包含编码N-乙酰葡糖胺糖苷酶α的核苷酸序列SEQ ID NO: 3；

登录号为DSM 32042的pAAV-CAG-cohNaglu-2型，包含编码N-乙酰葡糖胺糖苷酶α的核苷酸序列SEQ ID NO: 19；

登录号为DSM 32043的pAAV-CAG-cohNaglu-3型，包含编码N-乙酰葡糖胺糖苷酶α的核苷酸序列SEQ ID NO: 22。

3.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据权利要求1所述的重组AAV9载体或根据权利要求2所述的质粒。

4.根据权利要求3所述的药物组合物，其中所述药物组合物用于静脉内或脑池内给予。

5.根据权利要求1所述的重组AAV9载体或根据权利要求2所述的质粒在制备用于增加肌体中N-乙酰葡糖胺糖苷酶α的活性的药剂中的用途。

6.根据权利要求1所述的重组AAV9载体或者根据权利要求2所述的质粒用于生产用于治疗IIIB型粘多糖症的药剂的用途。

7.一种生产权利要求1中定义的载体的方法，其包括以下步骤：

i）提供第一载体，其包含设置在第一AAV末端重复序列和第二AAV末端重复序列之间的与编码所关注的N-乙酰葡糖胺糖苷酶α的核苷酸序列可操作地连接的CAG启动子；第二载体，其包含得自血清型9的AAV rep基因和AAV cap基因；以及包含所述的腺病毒辅助功能基因的第三载体；

ii）使用步骤i）所述的载体共转染感受态细胞；

iii）培养所述的步骤ii）转染的细胞；以及

iv）纯化由所述的步骤iii）的培养物得到的表达载体。

8.一种分离的细胞，其包含根据权利要求1所述的重组AAV9载体。