[发明专利]细胞重编程的方法

权利要求书

1.一种用于将第一细胞类型重编程为第二细胞类型的中间细胞的方法，包括以下步骤：

使所述细胞与第一试剂接触以调节所述第一细胞类型中的整联蛋白谱从而提供所述第二细胞类型的所述中间细胞。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一试剂是提供所述第二细胞类型的所述中间细胞的至少一种整联蛋白配体。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述至少一种整联蛋白配体是细胞外基质(ECM)蛋白或抗整联蛋白抗体。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述配体是抗整联蛋白抗体或其片段。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述抗整联蛋白抗体或其片段是整联蛋白抑制剂。

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述整联蛋白抑制剂抑制一种或多种整联蛋白亚基，所述一种或多种整联蛋白亚基选自由以下所组成的组：α1、α2、α3、α4、α5、α6、α7、α8、α9、α10、α11、αv、αD、αL、αM、αX、αE、αIIb、β1、β2、β3、β4、β5、β6、β7和β8。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述整联蛋白抑制剂与选自由以下所组成的组的整联蛋白亚基结合：αv、α5、β1、β3、β5、β6及其组合。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述亚基的组合是αvβ5或αvβ6。

9.根据权利要求2至8中任一项所述的方法，其中使所述第一细胞类型与所述至少一种整联蛋白配体接触足以改变基因表达的一段时间。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述一段时间选自由如下所组成的组：至少约1分钟、至少约3分钟、至少约5分钟、至少约10分钟、至少约15分钟、至少约30分钟、至少约60分钟、至少约90分钟、至少约2小时、至少约24小时、至少约2天或至少约5天。

11.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一试剂是核酸分子，其中所述细胞与所述核酸分子的接触改变至少一种整联蛋白基因的表达，从而调节所述细胞中的整联蛋白谱。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述核酸分子是包含至少一个与启动子可操作地连接的整联蛋白基因的表达载体以在所述细胞中过表达所述整联蛋白基因。

13.根据权利要求12所述的方法，其中所述表达载体是病毒载体。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述病毒载体是慢病毒载体。

15.根据权利要求1至14中任一项所述的方法，其中所述中间细胞类型是与所述第一细胞类型相比具有增高的干细胞样特性水平和/或上皮特性水平的细胞。

16.根据权利要求1至15中任一项所述的方法，还包括以下步骤：检测整联蛋白、多能性标志物和/或干细胞标志物的表达以确定所述第一细胞类型已转变为所述中间细胞类型。

17.根据权利要求16所述的方法，其中相对于所述第一细胞类型，整联蛋白β4和整联蛋白β6的表达增高指示中间细胞。

18.根据权利要求1至17中任一项所述的方法，还包括使所述中间细胞类型与包含第二试剂的组合物接触以实现所述中间细胞类型至所述第二细胞类型的重编程。

19.根据权利要求18所述的方法，其中所述第二试剂连接一种或多种整联蛋白亚基，所述一种或多种整联蛋白亚基选自由以下所组成的组：α1、α2、α3、α4、α5、α6、α7、α8、α9、α10、α11、αv、αD、αL、αM、αX、αE、αIIb、β1、β2、β3、β4、β5、β6、β7和β8。

20.根据权利要求19所述的方法，其中所述第二试剂连接选自由以下所组成的组的整联蛋白亚基：α2、α3、α6、αv、α5、β1、β3、β4、β5、β6及其组合。

21.根据权利要求20所述的方法，其中所述亚基的组合选自αvβ3、αvβ5、αvβ6、α6β1、α6β4、α2β1、α3β1和α5β1。

22.根据权利要求18所述的方法，其中所述第二试剂包含与所述至少一种整联蛋白结合以引起所述整联蛋白连接的一种或多种配体。