[发明专利]用于经由定向分化将前体细胞转化为胃组织的方法和系统有效
| 申请号： | 201580034910.4 | 申请日： | 2015-05-27 |
| 公开（公告）号： | CN106661548B | 公开（公告）日： | 2020-12-11 |
| 发明（设计）人： | J.M.威尔斯;K.W.麦克拉肯 | 申请（专利权）人： | 儿童医院医疗中心 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人： | 张文辉 |
| 地址： | 美国俄*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 经由 定向 分化 体细胞 转化 组织 方法 系统 | ||
1.在体外诱导胃组织形成的方法，所述方法包括：
a)使哺乳动物定形内胚层细胞与激活FGF信号传导途径的药剂、激活WNT信号传导途径的药剂和抑制BMP信号传导途径的药剂接触以形成前肠球体；
b)使步骤(a)的所述前肠球体与视黄酸接触以形成后部前肠球体；
c)使步骤(b)的所述后部前肠球体与视黄酸、EGF和抑制BMP信号传导途径的药剂接触以形成具有窦组织的胃类器官；
其中激活所述FGF信号传导途径的所述药剂是FGF4，并且以50至1500ng/ml的浓度提供；
其中激活所述WNT信号传导途径的所述药剂是Wnt3a，并且以50至1500ng/ml的浓度提供；
其中抑制所述BMP信号传导途径的所述药剂是头蛋白，并且以50至1500ng/ml的浓度提供；
其中步骤(b)的视黄酸以0.2μM至20μM的量施用；
其中所述EGF以100ng/mL的浓度提供；
所述方法不涉及人胚胎或人胚胎干细胞的工业或商业目的的应用。
2.在体外诱导胃组织形成的方法，所述方法包括：
a)使哺乳动物定形内胚层细胞与激活FGF信号传导途径的药剂、激活WNT信号传导途径的药剂和抑制BMP信号传导途径的药剂接触以形成前肠球体；
b)使步骤(a)的前肠球体与视黄酸接触以形成后部前肠球体；
c)使步骤(b)的所述后部前肠球体与视黄酸、EGF、激活WNT信号传导途径的药剂和抑制BMP信号传导途径的药剂接触以形成具有胃底组织的胃类器官；
其中激活所述FGF信号传导途径的所述药剂是FGF4，并且以50至1500ng/ml的浓度提供；
其中激活所述WNT信号传导途径的所述药剂是Wnt3a，并且以50至1500ng/ml的浓度提供；
其中抑制所述BMP信号传导途径的所述药剂是头蛋白，并且以50至1500ng/ml的浓度提供；
其中步骤(b)的视黄酸以0.2μM至20μM的量施用；
其中所述EGF以100ng/mL的浓度提供；
所述方法不涉及人胚胎或人胚胎干细胞的工业或商业目的的应用。
3.权利要求1的方法，其中所述哺乳动物定形内胚层细胞源自多能干细胞。
4.权利要求1至3中任一项的方法，其中所述哺乳动物定形内胚层细胞自多能干细胞衍生，所述多能干细胞与一种或多种选自以下的分子接触：激活蛋白，TGF-β生长因子超家族的BMP亚类；Nodal，BMP4和Wnt3a，其中所述多能干细胞选自成体干细胞和诱导的多能干细胞。
5.权利要求4的方法，其中所述激活蛋白是激活蛋白A或激活蛋白B。
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