[发明专利]用于视网膜及CNS基因疗法的AAV载体

权利要求书

1.重组腺相关病毒(rAAV)颗粒在制备用于将异源核酸递送至个体的眼部的药物中的用途，其中所述rAAV颗粒经配制用于施用于个体的视网膜下，其中所述rAAV颗粒包含：

a)rAAV衣壳，其包含含有一个或多个氨基酸取代的AAV血清型2(AAV2)衣壳蛋白，所述氨基酸取代在对应于氨基酸K532、R585和R588的一个或多个位置处用丙氨酸取代，编号基于SEQ ID NO:1，及

b)rAAV载体，其包含异源核酸和至少一个AAV反向末端重复。

2.rAAV颗粒在制备药物中的用途，所述药物具有与用包含野生型衣壳的rAAV转导细胞相比在将所述rAAV颗粒经视网膜下递送至个体的眼部后细胞的改进的rAAV转导或异源核酸的改进的表达，其中所述rAAV颗粒包含AAV2衣壳蛋白和rAAV载体，该rAAV载体包含异源核酸和至少一个AAV末端重复，其中所述rAAV衣壳蛋白在AAV衣壳蛋白中并入一个或多个氨基酸取代，所述氨基酸取代在对应于氨基酸K532、R585和R588的一个或多个位置处用丙氨酸取代，编号基于SEQ ID NO:1。

3.rAAV颗粒在制备药物中的用途，所述药物具有在将所述rAAV颗粒经视网膜下递送至个体的眼部后异源核酸的改进的表达，其中该rAAV颗粒包含AAV2衣壳蛋白和rAAV载体，该rAAV载体包含异源核酸和至少一个AAV末端重复，其中所述rAAV衣壳蛋白在AAV衣壳蛋白中并入一个或多个氨基酸取代，所述氨基酸取代在对应于氨基酸K532、R585和R588的一个或多个位置处用丙氨酸取代，编号基于SEQ ID NO:1。

4.包含rAAV颗粒的组合物在制备用于在个体中治疗眼部病症的药物中的用途，其中所述组合物经配制用于递送至所述个体的视网膜，其中所述rAAV颗粒包含

a)rAAV衣壳，其包含含有一个或多个氨基酸取代的AAV2衣壳蛋白，所述氨基酸取代在对应于氨基酸K532、R585和R588的一个或多个位置处用丙氨酸取代，编号基于SEQ ID NO:1，及

b)rAAV载体，其包含异源核酸和至少一个AAV末端重复。

5.根据权利要求1-4任一项所述的用途，其中所述一个或多个氨基酸取代减少所述rAAV颗粒与硫酸乙酰肝素蛋白聚糖的结合。

6.根据权利要求5所述的用途，其中所述一个或多个氨基酸取代将所示rAAV颗粒与硫酸乙酰肝素蛋白聚糖的结合减少至少10％，至少25％，至少50％，至少75％，或至少100％。

7.根据权利要求1-4任一项所述的用途，其中所述一个或多个氨基酸取代位于位置532，编号基于AAV2的VP1编号。

8.根据权利要求1-4任一项所述的用途，其中所述rAAV颗粒包含一个或多个rAAV衣壳蛋白，所述rAAV衣壳蛋白与SEQ ID NO:2、4和/或6具有至少90％，至少91％，至少92％，至少93％，至少94％，至少95％，至少96％，至少97％，至少98％，至少99％或100％序列同一性。

9.根据权利要求1-4任一项所述的用途，其中所述一个或多个氨基酸取代包括在位置R585和R588处的氨基酸取代，编号基于AAV2的VP1。

10.根据权利要求1-4任一项所述的用途，其中所述rAAV衣壳蛋白包含氨基酸取代K532A，编号基于AAV2的VP1。

11.根据权利要求1-4任一项所述的用途，其中所述异源核酸编码治疗性多肽或治疗性核酸。

12.根据权利要求1-4任一项所述的用途，其中所述异源核酸编码选自下组的多肽：抗氧化剂、神经营养因子、抗凋亡因子、抗血管生成因子和抗炎因子。