[发明专利]双特异性四价抗体及其制造和使用方法

说明书

一种双特异性四价抗体，其包含具有一对重链和一对轻链的IgG，和连接到重链或轻链的C或N端的两个scFv组分。所述双特异性四价抗体可具有对EGFR家族中两个不同成员的结合特异性。

相关专利申请的交叉参考

本申请要求2014年12月22号提交的美国临时申请第62095348号，名称为“双特异性抗体”的优先权，该文件全部内容在此引入作为参考。

序列表

与本申请相关联的序列表是以文本格式代替纸件副本的形式来提供，并且以引用方式并入本说明书中。包含所述序列表的文本文件名是序列表_ST25_0003PCT2.txt。所述文本文件大约227KB，在2015年12月18号创建，并经由EFS-Web进行电子提交。

技术领域

本公开总体涉及抗体治疗试剂技术领域，尤其涉及针对EGFR家族两个不同成员的双特异性四价抗体。

背景技术

ErbB/HER受体家族成员例如EGFR、HER2、HER3、HER4的过量表达和/或失调，已经表明在癌症的肿瘤发生中起重要作用。EGFR或者HER2的突变和扩增产生异常生长信号，其激活促成肿瘤发生的下游信号途径。针对EGFR和HER2的治疗性抗体和小分子抑制剂已被批准用于癌症的治疗(Arteaga等人,Nature Reviews Clinical Oncology 9 16-32,January2012)。针对EGFR家族成员，如EGFR和HER2的单克隆抗体已经在结肠癌(Price等人.,TheLancet Oncology 15(6),Pages 569-579,May 2014)、头颈部鳞状细胞瘤(Cohen,CancerTreatment Reviews 40(2014)567-577)、乳癌和胃癌(Arteaga等人,Nature ReviewsClinical Oncology 9 16-32,January 2012)中表现出良好的临床反应。几种治疗性抗EGFR抗体，包括西妥昔单抗、帕尼单抗和尼妥珠单抗是已获准用于几种癌症包括转移性结肠直肠癌、头颈部鳞状细胞癌和神经胶质瘤的疗法(Price和Cohen,Curr Treat OptionsOncol.2012Mar；13(l)：35-46；Bode等人,Expert Opin Biol Ther.2012Dec；12(12):1649-59)。令人遗憾的是最初对这些治疗剂反应的许多肿瘤由于对药剂的获得性抗性而最终发生进展(Jackman等人.J Clin Oncol 2010；8:357-60)。因此仍然存在着对更好的癌症治疗方法需求。

发明内容

本公开提供了双特异性四价抗体。双特异性四价抗体可以包括具有两条重链和两条轻链的免疫球蛋白G(IgG)部分，以及与重链或轻链的C或N末端共价连接的两个scFv部分。IgG部分可具有与EGFR家族第一成员结合的特异性。scFv部分可具有与EGFR家族第二成员结合的特异性。IgG部分和两个scFv部分共价连接以作为双特异性四价抗体起作用。为使本公开的目的和有益效果更加清楚，下面将结合相应的附图详细阐述优选实施例。

附图说明

现在参考附图详细描述本公开的优选实施例，其中类似的参考标号表示类似的元件。

图1是示出了实例二价单特异性免疫球蛋白G(IgG)抗体的结构域结构的图。

图2是示出了根据本发明的一个实施例，包含IgG部分和2个scFv部分的实例四价双特异性抗体的结构域的图。

图3示出了实例四价双特异性抗体1X1、1X2、1X3、1X4、1X4.2、1X5和1X6的结构域结构图。

图4示出了SI-1X4和SI-1X4.2之间的VH结构域序列比较，示出了5个氨基酸差异。

图5和6是示出了利用BLI的单体EGFR结合的图。

图7、8和9是示出了双特异性ELI结合的图。