[发明专利]γδT细胞及其用途

说明书

技术领域

本申请涉及制备和使用γδT细胞的方法，特别是使用γδT细胞在同种异体的或自体的受体受试者中治疗包括病毒感染、真菌感染、原生动物感染和癌症的病症。

背景技术

关于血液恶性肿瘤，已经建议并试验了同种异体干细胞移植(allo-SCT)。然而，这种同种异体治疗的主要缺点是移植失败和移植物抗宿主病(GVHD)的高发生率。已经利用HLA-单倍体相同的供体以尝试改善这类移植的结果。另外，已经尝试T细胞耗尽HLA匹配的基因干细胞移植(SCT)，使用移植物T细胞的离体耗尽以减少移植物抗宿主病；然而，有人认为这导致了增加的移植失败的风险。

如果接受者被严格的调节以降低移植失败的风险并且接受T细胞耗尽的移植物，有人认为免疫重建是不可接受的并且太多的患者将死于机会性感染。

γδT淋巴细胞代表人类外周血中次要的细胞亚群(小于10％)。表达Vγ9Vδ2(γ9δ2)T细胞受体的γδT细胞识别内源异戊烯焦磷酸(IPP)，所述内源异戊烯焦磷酸是作为甲羟戊酸途径失调的结果而在癌症细胞中过度产生的。γδT淋巴细胞能够产生丰富的促炎性细胞因子如IFN-γ，它们强效的细胞毒性有效功能和MHC-非依赖性的抗原识别使它们成为癌症免疫治疗的重要层级。已经表明γδT细胞能够在体外杀死许多不同类型的肿瘤细胞系和肿瘤，包括白血病、神经母细胞瘤和各种癌。此外，已经证明γδT细胞可以自发地或在用不同的双膦酸盐(包括唑来膦酸盐)治疗之后识别和杀死许多不同的分化的肿瘤细胞。人肿瘤细胞可以有效地呈递焦磷酸单酯化合物至γδT细胞诱导其增殖和IFN-γ生成。

目前，两种策略已经被用于γδT细胞肿瘤免疫治疗。第一种方法涉及在体外扩增的γδT细胞的过继细胞转移回患者(即自体治疗)。第二种方法涉及刺激γδT细胞的磷酸抗原(phosphoantigen)或氨基二膦酸与低剂量重组IL-2的一起在体内的治疗应用。

γδT细胞的自体移植策略已经用来克服上述同种异体干细胞移植的缺陷。作为这类自体移植技术的一部分，诱导和培养足够数量的γδT细胞以自体产生治疗效果的方法在先前已经被公开了，例如US 2002/0107392。然而，自体治疗策略具有许多缺点。

因此，需要替代的和/或改进的自体和同种异体治疗策略。

发明概述

虽然已经就自体应用讨论了与癌症治疗相关的γδT细胞治疗，迄今为止还没有考虑到同种异体提供这种γδT细胞治疗。考虑到由于与免疫系统介导的排斥相关的潜在问题，通常没有考虑γδT细胞治疗的这种同种异体应用。出人意料地，本发明人认为γδT细胞通常不会引起移植物抗宿主病，并且选择用于同种异体移植的γδT细胞可以允许将T细胞以最小的移植物抗宿主病风险提供给接受者。γδT细胞不是MHC限制性的(Tanaka Y等人，1995)。本发明人认为这将允许γδT细胞被应用于同种异体移植以提供可行的治疗，其中γδT细胞能够靶向细胞进行MHC单倍型非依赖性的细胞溶解。由于缺乏通过γδT细胞识别MHC呈递抗原，本发明人认为在从包括B细胞和αβT细胞受体(TCR)的T细胞的其它白细胞充分纯化的γδT细胞的高纯度同种异体转移物中，GVHD的风险将被最小化。另外，认为移植物排斥的机会低，所述移植物排斥是由于接受者在某些疾病状态中的免疫受损状态，包括但不限于具有严重病毒感染的患者(例如埃博拉、HIV和流感以及PTLD-EBV患者)和具有其它癌症类型的患者。

如上所述，先前的治疗策略包括在同种异体干细胞移植之前，使用阴性选择或阳性选择方法从供体血液，特别是外周血液中去除T细胞。

本发明人确定了一种允许从供体受试者中收集细胞并且处理这类供体细胞以允许向受体受试者同种异体地提供足够数量的γδT细胞的方法，使得γδT细胞可以对受体受试者发挥治疗效果。