[发明专利]用于干斑的自动化HIV-1病毒载量测试程序

权利要求书

1.一种检测血液样品中的HIV-1核酸的自动化方法，该方法包括：

a) 提供：i) 在固体载体上干燥的疑似感染HIV的血液样品，ii)洗脱缓冲液，iii) 自动化的、可编程样品制备仪器，iv) 自动化的、可编程PCR仪器，v) 适合于检测HIV-1核酸的PCR试剂，和vi) 任选地，DNA酶；

b) 用洗脱缓冲液从固体载体洗脱血液样品以创建洗脱的样品；

c) 将洗脱的样品装入自动化的、可编程样品制备仪器中，供进一步的核酸提取和纯化，并提取和纯化任何核酸，以创建包含提取的核酸的处理过的样品；

d) 将PCR试剂装入自动化的、可编程PCR仪器中；

e) 启动自动化程序以将PCR试剂以等分的量分配到处理过的样品中；

f) 用自动化的、可编程PCR仪器对处理过的样品中提取的核酸进行PCR；

g) 分析用自动化的、可编程PCR仪器生成的PCR结果，以确定是否任何样品包含HIV-1核酸；

h) 其中，所述洗脱缓冲液包含约3.5 M GITC、约5%聚山梨醇酯20、约50 mM KOAc，约pH6.0；

i) 其中，任选地，将DNA酶加入到处理过的样品、PCR试剂或包含PCR试剂的处理过的样品的一种或多种中。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法还包括阴性对照和阳性对照。

3.根据权利要求1所述的方法，其中步骤b)是于室温下约20分钟。

4.根据权利要求3所述的方法，其中步骤b)用温和的间歇混合法进行。

5.根据权利要求1所述的方法，其中步骤b)是于约55℃下约30分钟。

6.根据权利要求5所述的方法，其中步骤b)用温和的间歇混合法进行。

7.根据权利要求1所述的方法，其中所述自动化程序是通过软件命令编程的。

8.根据权利要求1所述的方法，其中进行步骤i)和所述DNA酶不需要特定的DNA酶反应缓冲液，于环境温度或PCR循环阶段期间使用的温度下是有效的，在30分钟的时间段内有效地降解DNA，在有效地降解DNA后不需要被灭活，并且对RNA序列的检测没有负面的影响。

9.根据权利要求1所述的方法，其中所述固体载体是滤纸。

10.根据权利要求1所述的方法，其中所述核酸是RNA。

11.根据权利要求1所述的方法，其中所述核酸是前病毒DNA，和其中不进行权利要求1的任选的步骤i)。