[发明专利]基因表达系统

权利要求书

1.包括第一和第二基因表达系统的多核苷酸序列，其中：

i)所述第一基因表达系统包括组分：可操作地连接至第一启动子的第一显性致死基因、编码第一转录激活因子的基因、以及第一剪接控制序列，

ii)所述第二基因表达系统包括组分：可操作地连接至第二启动子的第二显性致死基因、编码第二转录激活因子的基因、以及第二剪接控制序列，

其中

所述转录激活因子中的每一个能够激活至少一个所述启动子，条件是当两个所述转录因子表达时两个所述启动子都被激活，

所述第一和第二剪接控制序列中的每一个通过可变剪接分别介导所述第一和第二显性致死基因的雌性特异表达，

所述第一和第二转录激活因子中的每一个的反式激活活性分别被第一和第二外源控制因子阻遏，其中所述第一外源控制因子与所述第二外源控制因子相同或不同，以及

所述第一基因表达系统的所述组分中的每一个与所述第二基因表达系统的所述组分相同或不同。

2.如权利要求1所述的多核苷酸序列，其中所述第一转录激活因子为所述第一显性致死基因的基因产物和/或所述第二转录激活因子为所述第二显性致死基因的基因产物，以使得所述转录因子还提供所述显性致死基因赋予的致死效应。

3.如权利要求1或2所述的多核苷酸序列，其中所述第一和第二剪接控制序列中的一个或两个连同剪接体通过介导各自的显性致死基因的RNA转录本的剪接而产生编码功能性蛋白的mRNA和至少一种编码非功能性蛋白的mRNA，来介导各自的显性致死基因的雌性特异表达，其中所述编码功能性蛋白的mRNA是在雌性中产生。

4.如前述权利要求中任一项所述的多核苷酸序列，其中所述第一和第二启动子中的每一个在能够激活所述启动子的所述转录激活因子不存在时基本上无活性。

5.如前述权利要求中任一项所述的多核苷酸序列，其中所述第一和第二致死基因中的一个或两个独立地为tTA或tTAV基因变体，优选TAV基因变体。

6.如权利要求5所述的多核苷酸序列，其中所述第一和第二显性致死基因中的一个或两个独立地为tTAV(SEQ ID NO:26)、tTAV2(SEQ ID NO:27)和tTAV3(SEQ ID NO:28)之一。

7.如前述权利要求中任一项所述的多核苷酸序列，其中所述第一和第二剪接控制序列中的一个或两个独立地源自tra内含子、dsx基因或Actin-4基因，优选tra内含子。

8.如权利要求7所述的多核苷酸序列，其中所述第一和第二剪接控制序列中的一个或两个源自实蝇科，优选源自蜡实蝇属、果实蝇属、实蝇属和绕实蝇属之一。

9.如权利要求8所述的多核苷酸序列，其中所述第一和第二剪接控制序列中的一个或两个源自地中海实蝇。

10.如权利要求8所述的多核苷酸序列，其中所述第一和第二剪接控制序列中的一个源自地中海实蝇，另一个剪接控制序列源自不同的物种。

11.如前述权利要求中任一项所述的多核苷酸序列，其中所述第一和第二基因表达系统中的一个或两个还包括与各自的启动子关联的增强子，所述转录激活因子中的至少一个在各自的增强子处起作用。

12.如权利要求11所述的多核苷酸序列，其中所述增强子，或所述增强子中的一个或两个，为包括一个或多个tetO重复序列的tetO元件。

13.如权利要求12所述的多核苷酸序列，其中所述或每个增强子独立地为tetOx7、tetOx14或tetOx21。

14.如前述权利要求中任一项所述的多核苷酸序列，其中所述第一和第二启动子中的一个或两个在至少胚胎发育期间表达。

15.如前述权利要求中任一项所述的多核苷酸序列，其中所述第一和第二启动子中的一个或两个为最小启动子。

16.如权利要求14或15所述的多核苷酸序列，其中所述第一和第二启动子中的每一个独立地为Hsp70或sryα，优选其中一个为Hsp70，另一个为sryα。