[发明专利]用于从微藻生物质提取可溶性蛋白的方法在审
申请号: | 201580039634.0 | 申请日: | 2015-07-16 |
公开(公告)号: | CN106661082A | 公开(公告)日: | 2017-05-10 |
发明(设计)人: | S·帕蒂尼尔 | 申请(专利权)人: | 罗盖特公司 |
主分类号: | C07K1/14 | 分类号: | C07K1/14;C07K1/34 |
代理公司: | 北京市金杜律师事务所11256 | 代理人: | 孟凡宏,谢燕军 |
地址: | 法国莱*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 生物 提取 可溶性 蛋白 方法 | ||
1.一种用于从小球藻属微藻生物质制备分离蛋白的方法,其特征在于它包括以下步骤:
-提供一种由发酵产生的微藻生物质,
-洗涤该生物质,以便消除间质可溶性化合物并且浓缩,
-在卧式珠磨机类型系统中实施对经过洗涤并且浓缩的生物质的机械研磨,以获得一种乳液,
-将以此方式获得的乳液变构,
-三相分离,以便从包含脂质和细胞碎片的部分中分离可溶性部分,
-回收以此方式获得的可溶性部分,以获得可溶性分离蛋白,然后
-将所述分离蛋白蒸发、巴氏灭菌并雾化。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于这些小球藻属微藻选自由普通小球藻、根腐小球藻和原壳小球藻组成的组,并且更具体地是原壳小球藻。
3.如权利要求1和2中任一项所述的方法,其特征在于通过酶预消化、通过用极性溶剂进行处理和/或通过靶向该乳液的蛋白部分的受控碱处理,来使该乳液变构。
4.如权利要求1和2中任一项所述的方法,其特征在于通过调节pH和温度、通过用极性溶剂进行处理和/或通过靶向与该乳液的脂质部分的界面的酶消化,来使该乳液变构。
5.如权利要求1到4中任一项所述的方法,其特征在于经过变构的乳液的三相分离是通过离心进行的。
6.如权利要求1到5中任一项所述的方法,其特征在于通过以下方式从该可溶性部分获得该可溶性分离蛋白:
-通过微孔过滤将所述可溶性部分澄清,以便从中除去残留不溶性物质,
-在具有小于5kDa的截止阈值的膜上对澄清的可溶性部分进行超滤,并且
-任选地,在6和8之间,优选在7的pH值下,进行中和。
7.如权利要求1到5中任一项所述的方法,其特征在于通过以下方式从该可溶性部分获得该可溶性分离蛋白:
-通过将介质的pH调节至4和5之间的值,在其pI下沉淀蛋白,
-离心或者微孔过滤,以回收沉淀的蛋白,并且
-在6和8之间,优选7的pH下,溶解于水中。
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