[发明专利]肺炎支原体检测试剂及其用途

说明书

本发明的课题在于，提供一种可适用于使用免疫层析法的肺炎支原体感染的检测的特异性抗体及使用其的检测试剂等。提供一种含有针对肺炎支原体的P30蛋白质的特异性抗体的肺炎支原体检测试剂及试剂盒、以及免疫层析试验设备。

技术领域

本发明涉及一种肺炎支原体检测试剂及其用途(免疫层析法试 验设备、肺炎支原体感染检查法)等。本申请基于2014年7月30 日所申请的日本国专利申请第2014-155388号主张优先权，该专利申 请的全部内容通过参照而被引用。

背景技术

与细菌性的典型肺炎不同，在胸部X射线照片中呈现肺浸润像 的非细菌性肺炎的30～40％的原因为肺炎支原体。从人体分离的支原 体中，病原性明显的物质为肺炎支原体。

支原体肺炎多见于幼儿、学童。潜伏期间平均为14天。有多种 多样的并发症的报道，在小儿中，脑炎、格林巴利综合征、皮疹等的 皮肤炎等的并发症多。细菌性肺炎虽急剧减少，但肺炎整体中支原体 肺炎的比率升高。肺炎支原体作为社区获得性肺炎的原因菌，其数量 仅次于肺炎球菌。

支原体为可自增殖的最小的微生物，难以用光学显微镜进行观 察。与其它细菌不同的是其不具有细胞壁，因此，在青霉素及头孢烯 类抗生素中不显示感受性，在治疗中通常使用四环素系或大环内酯类 的抗生素。

为了诊断肺炎支原体感染，可利用如下的各种方法。来自咽拭 子、咳痰的分离培养法用于确定诊断，但由于需要特殊的培养基及长 的天数(2～4周)，因此不能应用于迅速诊断。在由肺炎支原体感染 所产生的抗体的检测法中，例如利用粒子凝集法(PA)、红细胞凝 集反应(IHA)等检测血清抗体。但是，均不能应用于急性期的诊断。

在利用了咽拭子、咳痰等检体中的肺炎支原体核酸的基因扩增 技术的检测法中，聚合酶连锁反应(PCR)引起的判断与作为确定诊 断的分离培养法的结果非常相关。另外，作为与PCR相比简便的手 段，也报道有LAMP(Loop-Mediated Isothermal Amplification)法的 利用。但是，均需要复杂的操作，在测定中需要很多的劳动力，不能 应用于迅速的诊断。

在支原体肺炎中，由于有效的抗生素受到限制，因此，在医疗 现场高度需要在感染初期即判定肺炎支原体感染的有无。一般而言， 如果可得到特异性抗体，则可以利用ELISA法等酶免疫测定法 (EIA)。另外，可以应用于化学发光法、色素法、荧光法等各种测定法。但是，任一种方法都需要各自专用的测定装置，在这点上不能 说抓住医疗现场的需求。另一方面，免疫层析法(以下，称为免疫层 析法)的操作简便，不需要特别的装置，进而可以在短时间(例如 10～20分钟)内测定。但是，可用EIA法检测的抗体不一定可以应用 于免疫层析法，大多需要更高的特异性及高灵敏度的抗体。关于肺炎 支原体感染，目前，市售有抗P1蛋白质单克隆抗体(专利文献1) 或使用了抗Ribosomal Protein L7/L12蛋白质特异性抗体的免疫层析 用试剂(专利文献2)并应用于诊断，但不能说灵敏度高，难以说显 示与临床现场中的需求相应的充分的性能。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2013-72663号公报

专利文献2：日本特开2012-6968号公报

非专利文献

非专利文献1：Varshney AK et al.,Clin Vaccine Immunol.Feb 2008；15(2):215-220.

发明内容

发明所要解决的课题

因此，本发明的课题在于，提供一种可适用于利用免疫层析法 的肺炎支原体感染的检测的特异性抗体及使用其的检测试剂等。

用于解决课题的技术方案