[发明专利]变体硫酯酶及使用方法

权利要求书

1.一种非天然蛋白质，一种编码该非天然蛋白质的分离的基因，一种表达该非天然蛋白质的表达盒，或一种包括该表达盒的宿主细胞，其中该非天然蛋白质与SEQ ID NO:1具有至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％一致性，并且在对应于SEQ ID NO:1的位置163的位置处包括Y或F，和/或在对应于SEQ ID NO:1的位置186的位置处包括P、K、或A，并且任选地在对应于SEQ ID NO:1的位置228的位置处包括K。

2.一种用于生产三酸甘油酯油的方法，该方法包括在宿主细胞中表达如权利要求1所述的蛋白质或如下蛋白质，该蛋白质与SEQ ID NO:3-8之一包括至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％一致性，并且在对应于SEQ ID NO:1的位置163的位置处包括Y或F，和/或在对应于SEQ ID NO:1的位置186的位置处包括P、K、或A，并且任选地在对应于SEQ ID NO:1的位置228的位置处包括K；培养该宿主细胞；并分离该油。

3.一种在由任选地产油宿主细胞产生的油的脂肪酸谱中用于增加C8和/或C10脂肪酸的方法，该方法包括提供编码FATB酶的亲本基因，使该基因突变以在对应于SEQ ID NO:1的位置163的位置处具有Y或F，和/或在对应于SEQ ID NO:1的位置186的位置处具有P、K、或A，并且任选地在对应于SEQ ID NO:1的位置228的位置处具有K；在该宿主细胞中表达该突变基因；并产生该油，由此相对于该亲本基因，该油的脂肪酸谱在C8和/或C10脂肪酸方面增加。

4.如权利要求3所述的方法，其中该编码FATB酶的基因编码如下蛋白质，该蛋白质与SEQ ID NO:1、13或14具有至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％一致性。

5.一种非天然蛋白质，一种编码该非天然蛋白质的分离的基因，一种表达该非天然蛋白质的表达盒，或一种包括该表达盒的宿主细胞，其中该非天然蛋白质与SEQ ID NO:13具有至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％一致性，并且在对应于SEQ ID NO:13的位置230的位置处具有A或K。

6.一种用于生产三酸甘油酯油的方法，该方法包括在宿主细胞中表达如权利要求5所述的蛋白质，培养该细胞并分离该油。

7.一种非天然蛋白质，一种编码该非天然蛋白质的分离的基因，一种表达该非天然蛋白质的表达盒，或一种包括该表达盒的宿主细胞，其中该非天然蛋白质与SEQ ID NO:45具有至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％一致性，并且在对应于SEQ ID NO:45的位置74的位置(G96)处包括A、T或V，和/或在对应于SEQ ID NO:45的位置69的位置(L91)处包括F、K、或S，和/或在对应于SEQ ID NO:45的位置134的位置(T156)处包括F、A、K或V。

8.如权利要求7所述的非天然蛋白质，一种编码该非天然蛋白质的分离的基因，一种表达该非天然蛋白质的表达盒，或一种包括该表达盒的宿主细胞，进一步地其中该非天然蛋白质在对应于SEQ ID NO:45的位置89的位置(S111)处包括A或V，和/或在对应于SEQ ID NO:45的位置171的位置(V193)处包括A，和/或在对应于SEQ ID NO:45的位置86的位置(G108)处包括A或V。

9.一种用于生产三酸甘油酯油的方法，该方法包括在宿主细胞中表达如权利要求7或权利要求8所述的蛋白质或如下蛋白质，该蛋白质与SEQ ID NO:45和15-29之一包括至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％一致性，并且在对应于SEQ ID NO:45的位置74的位置(G96)处包括A、T或V，和/或在对应于SEQ ID NO:45的位置69的位置(L91)处包括F、K、或S，和/或在对应于SEQ ID NO:45的位置134的位置(G156)处包括F、A、K或V；培养该宿主细胞；并分离该油。