[发明专利]对SSEA4抗原具有特异性的嵌合抗原受体

说明书

本发明提供包含对SSEA4具有特异性的抗原结合结构域的嵌合抗原受体(CAR)、表达所述CAR的工程化细胞群体和包含表达所述CAR的所述遗传修饰细胞的药物组合物。所述药物组合物可用于治疗患有癌症的受试者的癌症，其中所述癌症的癌细胞的至少一个亚群表达SSEA4。

技术领域

本发明涉及癌症治疗领域，特别地涉及使用抗原SSEA4作为靶标的癌症治疗。

背景技术

癌症是涉及失调的细胞生长的一组广泛的疾病。在癌症中，细胞不受控地分裂并生长，从而形成恶性肿瘤，并且侵入身体的邻近部位。癌症还可通过淋巴系统或血流扩散到身体更远的部分。影响人类的有超过200种不同的已知癌症。虽然良好的治疗选择可用于许多癌症类型，但是其他的癌症类型仍然存在未被满足的医疗需求。特别是，卵巢癌、乳腺癌和三阴性乳腺癌(TNBC)是具有有限的治疗选择的恶性肿瘤。TNBC是与高转移风险和早期复发相关的侵袭性乳腺癌亚型。目前，TNBC患者全身性治疗的主要选择是总体效果较差且具有严重副作用的化疗。最初，大部分TNBC患者对新辅助化疗治疗有反应，但只有约20％达到预后良好的病理完全反应(pCR)。值得注意的是，大多数患者因为肿瘤对化疗具有较低的重新敏感性(de novo sensitivity)或者产生对化疗的抗性而没有达到pCR。在这些情况下，肿瘤由于化疗而退化，但残余癌细胞存留并在约40％患者中，在化疗后三年内导致肿瘤复发和转移。

唾液酸-糖脂阶段特异性胚胎抗原4(SSEA4)是唾液酸-糖脂表位，也称为单唾液酸红细胞戊糖神经酰胺(monosialosyl globopentaosylceramide)(MSGb5)，最初在人畸胎癌细胞中识别到(Kannagi R等,EMBO J.1983；2(12):2355-61；Saito S等,J BiolChem.2003Jul 18；278(29):26474-9)。SSEA4在未分化人胚胎干(ES)细胞、诱导多能(iPS)细胞、胚胎癌(EC)细胞和胚胎生殖(EG)细胞以及多种成体干细胞(如牙髓干细胞、脐带血来源的极小胚胎样干细胞(VSEL)和间质基质细胞(Gang EJ等,Blood.2007Feb 15；109(4):1743-51；Truong TT等,Invest Ophthalmol Vis Sci.2011Aug 11；52(9):6315-20)上发现。

在EP14305477.3中公开了SSEA4是标志化疗抗性癌细胞亚群的生物标志物。

SSEA4的功能仍然未知。

嵌合抗原受体(CAR)对于癌症的过继性细胞免疫治疗提供了有前景的途径。通常，CAR包含通过铰链和跨膜区连接到T-细胞信号传导分子的胞质结构域的对肿瘤相关抗原(TAA)特异性的抗体单链可变片段(scFv)。最常见的淋巴细胞激活部分包括与T-细胞触发(例如，CD3ζ)部分串联的T-细胞共刺激(例如，CD28、CD137、OX40、ICOS和CD27)结构域。CAR介导的过继性免疫治疗允许CAR移植细胞以非HLA限制方式直接识别靶肿瘤细胞上的TAA。

虽然少于25％的乳腺癌患者受益于化疗治疗(CLIFFORD A.HUDIS和LUCA GIANNI,The Oncologist 2011；16(suppl 1):1-11)，但这种全身性方法仍然用作标准治疗。由于严重的副作用，鉴定可以用作癌症(如，人乳腺癌)治疗选择的标志物将是高度有益的。

发明内容

SSEA4是癌细胞的细胞表面抗原，因此它可以用于表达SSEA4的癌细胞的靶向生物或免疫治疗，包括但不限于卵巢癌、肾细胞癌和TNBC。我们现在出人意料地发现，工程化细胞，优选表达对抗原SSEA4具有特异性的嵌合抗原受体的工程化T细胞，能够在体外和体内杀伤表达SSEA4的细胞。因此，本发明涉及经转导以表达嵌合抗原受体的细胞的过继性细胞转移策略，其中所述CAR靶向于SSEA4(“SSEA4-CAR”)，导致识别表达SSEA4的癌细胞并与其结合。然后该遗传修饰细胞，即CAR表达细胞，执行其特定功能，例如杀伤靶细胞、分泌细胞因子和/或增殖。