[发明专利]培养的哺乳动物角膜缘干细胞、其产生方法和其用途

权利要求书

1.一种分离的角膜缘干细胞或祖细胞(LSC)群体或LSC样群体，其包含化学合成、重组或分离的编码PAX6的核酸，所述核酸整合到染色体中，或者未整合而保持为染色体外遗传材料，其中所述分离的LSC群体基本上不含非LSC细胞，或其中所述LSC样群体基本上不含非LSC样细胞，或其中所述分离的LSC或LSC样群体基本上不含非LSC和非LSC样细胞。

2.根据权利要求1所述的分离的LSC群体或LSC样群体，其中所述化学合成、重组或分离的核酸可表达PAX6或其片段，其中PAX6或其片段可维持LSC状态或LSC样状态或可将干细胞或祖细胞引导至LSC状态或LSC样状态，并且其中LSC状态或LSC样状态将细胞群体限定于产生角膜上皮细胞(CEC)的分化途径。

3.根据权利要求2所述的分离的LSC群体或LSC样群体，其中所述化学合成、重组或分离的核酸表达PAX6或其片段，其中PAX6或其片段可维持LSC状态或LSC样状态或将干细胞或祖细胞引导至LSC状态或LSC样状态，并且其中LSC状态或LSC样状态将细胞群体限定为产生角膜上皮细胞的分化途径。

4.一种分离的皮肤上皮干细胞(SESC)群体或SESC样群体，其包含化学合成、重组或分离的编码PAX6的核酸，所述核酸整合到染色体中，或者未整合而维持为染色体外遗传材料，其中所述分离的SESC群体基本上不含非SESC细胞，或其中所述SESC样群体基本上不含非SESC样细胞，或其中所述分离的SESC群体或SESC样群体基本上不含非SESC细胞和非SESC样细胞，或其中所述分离的SESC群体或SESC样群体基本上不含非SESC细胞、非SESC样细胞、非LSC细胞和非LSC样细胞。

5.根据权利要求4所述的分离的SESC群体或SESC样群体，其中所述化学合成、重组或分离的核酸可表达PAX6或其片段，其中PAX6或其片段可维持LSC状态或LSC样状态或可将干细胞或祖细胞引导至LSC状态或LSC样状态，并且其中LSC状态或LSC样状态将细胞群体限定为产生角膜上皮细胞的分化途径。

6.根据权利要求5所述的分离的SESC群体或SESC样群体，其中所述化学合成、重组或分离的核酸表达PAX6或其片段，其中PAX6或其片段将SESC细胞或SESC样细胞引导至LSC状态或LSC样状态，其中LSC状态或LSC样状态将细胞群体限定为产生角膜上皮细胞的分化途径。

7.一种药物组合物，其包含根据权利要求1所述的LSC群体或LSC样群体和适合的载体。

8.一种药物组合物，其包含根据权利要求4所述的SESC群体或SESC样群体和适合的载体。

9.根据权利要求1所述的LSC群体或LSC样群体，其可被培养至少17次传代而不分化为CEC。

10.根据权利要求1所述的LSC群体或LSC样群体，其中在第3次传代时表达PAX6和p63的细胞的百分比与第17次传代时的百分比相同。

11.根据权利要求1所述的LSC群体或LSC样群体，其中在第3次传代时表达K19和Ki67的细胞的百分比略大于第17次或第17次以后传代时的百分比。

12.根据权利要求1所述的LSC群体或LSC样群体，其包含可稳定繁殖40-60代而不分化为CEC的细胞。

13.根据权利要求1所述的LSC群体或LSC样群体，其分化为角膜上皮细胞群体。

14.根据权利要求4所述的SESC群体或SESC样群体，其可被培养至少17次传代而不分化为皮肤表皮细胞或角膜上皮细胞。

15.根据权利要求4所述的SESC群体或SESC样群体，其包含可稳定繁殖40-60代而不分化为皮肤表皮细胞或角膜上皮细胞的细胞。

16.根据权利要求4所述的SESC群体或SESC样群体，其包含已将细胞命运转变为LSC或LSC样细胞命运的SESC细胞或SESC样细胞。

17.根据权利要求16所述的SESC群体或SESC样群体，其中所述SESC群体或SESC样群体已采用LSC或LSC样细胞命运，并且其中不存在所述SESC或SESC样细胞命运。