[发明专利]疫苗

说明书

技术领域

本发明涉及一种重组登革亚单位疫苗，针对所有4种登革血清型DENV-1、DENV-2、DENV-3和DENV-4。本发明还涉及一种基于VLP的重组登革四价候选疫苗，包括乙型肝炎病毒的表面抗原(HBsAg)和四价EDIII-T分子。本发明还涉及一种生产基于VLP(virus like particle)的重组登革四价候选疫苗的方法。

背景技术

由四种抗原性不同的登革病毒(DENVs)引起的登革疾病在世界上150多个国家是一个严重的健康问题，尤其是在像印度这样高度流行的国家。近年来，这种疾病呈上升趋势，由于缺乏有效的疫苗或抗病毒疗法，已成为全球公共卫生的威胁。登革疾病是全球医疗保健系统的一个挑战，特别是在疾病爆发时，为了控制传病媒介每年需要耗费数百万美元。一种高效、安全且具有成本效益的疫苗可以解决受登革病毒影响的国家的负担。尽管在过去三十年里付出了很多努力开发一种用于限制该疾病传播的预防疫苗，但是到目前为止，市场上仍未有得到许可的疫苗。世界各地的研究小组/公司正在努力开发一种针对登革病毒所有血清型的有效四价疫苗。早期开发的大多数疫苗都是基于活减毒嵌合病毒，其中一些疫苗目前正在临床试验。然而，由于病毒干扰等限制，研究重点已经转移到亚单位疫苗，特别是利用登革病毒包膜蛋白E的第三结构域。目前已经报道许多利用该结构域的专利/出版物。

虽然基于活黄病毒的登革疫苗已经进入第三期临床试验，但是已经报道了因为病毒干扰引起的问题。病毒干扰大概是因为这四种疫苗病毒株的复制能力和免疫原性的差异引起的。

非复制性亚单位病毒具有克服与活病毒疫苗有关的病毒干扰风险的潜能[Swaminathan,Khanna,Ν.(2009),登革：生物学研究进展及转化研究现状，现代分子医学9:152-173]。目前正在探索使用重组DNA和蛋白质为基础的亚单位疫苗的几种方法。这样的重组亚单位疫苗大多数聚焦于重要的包膜蛋白E。大量证据还表明这种E蛋白的疫苗性能大多数与第三结构域(EDIII)有关。

已经证实DENV包膜蛋白第三结构域(EDIII)负责宿主细胞受体识别和中和抗体生成[Swaminathan,Khanna,Ν.(2009).登革：生物学研究进展及转化研究现状，现代分子医学9:152-173；Guzman,M.G.Hermida,L.,Bernardo,L.,Ramirez,R.,Guillen,G.(2010).作为登革疫苗靶点的包膜蛋白第二结构域]。此外，已经报道EDIII具有非常低的诱导交叉反应性抗体的内在潜能[Simmons,Μ.,Nelson,W.M.,Wu,S.J.,Hayes,C.G.(1998).针对小鼠登革2型病毒感染的重组登革包膜蛋白B结构域融合蛋白的保护效力评价；美国热带医学与卫生杂志58:655-662；Simmons,Μ.,Murphy,G.S.,Hayes,C.G.(2001).简讯：接种四价登革重组蛋白亚单位疫苗的小鼠的抗体反应，美国热带医学与卫生杂志65:159-161]。这些属性使EDIII成为优秀的候选疫苗。作为潜在登革疫苗抗原的四价蛋白形式的EDIII的功效已经被下述发明家证实[Etemad,B.,Batra,G.,Rout,R.,Dahiya,S.,Khanam,S.,Swaminathan,S.,Khanna,Ν.(2008)]。

已经报道许多利用登革病毒包膜蛋白E第三结构域的专利/出版物，即：