[发明专利]碳水化合物结合模块变体以及编码它们的多核苷酸在审
申请号: | 201580047693.2 | 申请日: | 2015-09-04 |
公开(公告)号: | CN107002056A | 公开(公告)日: | 2017-08-01 |
发明(设计)人: | P·韦斯特;K·博克;T·索伦森;M·温达尔;B·麦克布莱耶 | 申请(专利权)人: | 诺维信公司 |
主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42;C12N15/56;C12N15/82;A01H5/00 |
代理公司: | 北京尚诚知识产权代理有限公司11322 | 代理人: | 顾小曼 |
地址: | 丹麦,*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 碳水化合物 结合 模块 变体 以及 编码 它们 多核苷酸 | ||
1.一种在对应于SEQ ID NO:2的位置483、491、509或510的一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代的纤维二糖水解酶变体,其中该变体具有纤维二糖水解酶活性。
2.如权利要求1所述的变体,该变体是选自以下的亲本纤维二糖水解酶的变体:(a)与SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:44或SEQ ID NO:78的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽;(b)由在至少低严格条件下与以下杂交的多核苷酸编码的多肽:(i)SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:41、SEQ ID NO:43或SEQ ID NO:77的成熟多肽编码序列,(ii)其基因组DNA或cDNA序列,或(iii)(i)或(ii)的全长互补体;(c)由与SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:41、SEQ ID NO:43或SEQ ID NO:77的成熟多肽编码序列具有至少60%序列一致性的多核苷酸编码的多肽;以及(d)(a)、(b)或(c)的一个片段,该片段具有纤维二糖水解酶活性。
3.如权利要求1或2所述的变体,该变体与SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:44或SEQ ID NO:78的成熟多肽具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、或至少99%,但小于100%序列一致性。
4.如权利要求1-3中任一项所述的变体,该变体在对应于位置483的位置处包括一个取代,例如用Tyr、Phe或Trp的取代(例如Y483W)。
5.如权利要求1-4中任一项所述的变体,该变体在对应于位置491的位置处包括一个取代,例如用Tyr、Phe或Trp的取代(例如Y491W)。
6.如权利要求1-5中任一项所述的变体,该变体在对应于位置509的位置处包括一个取代,例如取代是用Tyr、Phe或Trp进行的(例如Y509W)。
7.如权利要求1-6中任一项所述的变体,该变体在对应于位置510的位置处包括一个取代,例如取代是用Tyr、Phe或Trp进行的(例如Y510W)。
8.如权利要求1-7中任一项所述的变体,该变体包括以下项或者由以下项组成:SEQ ID NO:90或SEQ ID NO:92,或其成熟多肽序列。
9.一种具有纤维素分解活性的杂合多肽,该杂合多肽包括:
(a)在包括纤维素分解酶的异源催化结构域的杂合多肽的N-末端处的片段;和
(b)在包括碳水化合物结合模块(CBM)变体的第一多肽片段的C-末端处的片段,
其中该CBM变体在对应于SEQ ID NO:4的位置5、13、31或32的一个或多个(例如,若干个)位置处包括取代。
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