[发明专利]CD44的分离的多肽及其应用

说明书

本发明提供CD44的分离的多肽。因此，提供由选自SEQ ID NOs:1‑3的氨基酸序列组成的分离的多肽。还提供一种包含选自SEQ ID NOs:1‑3的氨基酸序列的分离的封端修饰的多肽，其中修饰的多肽具有抗炎活性。还提供物质组合物、融合蛋白和药用组合物和它们在治疗炎性疾病中的用途。

发明领域和背景

本发明，在其一些实施方案中，涉及CD44的分离的多肽，且更特别地，但不排外地，涉及CD44vRA的分离的多肽及其在治疗炎性疾病中的用途。

CD44是一种细胞表面粘附分子，其参与多种细胞功能，包括细胞-细胞和细胞-基质相互作用、细胞迁移、程序性细胞死亡(细胞凋亡)，或相反地，细胞存活和增殖。

CD44是对于透明质酸(HA)的主要细胞表面受体，但它也已显示结合蛋白例如胶原蛋白、纤连蛋白、纤维蛋白原、层粘连蛋白、粘膜血管地址素和骨桥蛋白。CD44对于将循环淋巴细胞募集到炎症部位是必要的，并且CD44 (和有时透明质酸)的显著积聚，在密集细胞迁移和细胞增殖的区域被检测到，如在创伤愈合、组织重塑、炎症、形态发生和癌发生中。

小鼠和人CD44的基因组序列包含在5'末端的5个恒定外显子，和在3'端的5个恒定外显子。小鼠CD44基因包含在分子中间的10个变体外显子，称为V₁-V₁₀，导致总共20个外显子。人CD44基因仅包含这10个变体外显子中的9个(V₂-V₁₀)，因此包含总共19个外显子。不同的V₂-V₁₀选择性剪接产生CD44的许多同种型，其表达变体外显子(称为外显子Vx，x=1-10)的各种组合，其被插入近膜结构域中并构成分子的可变区。这些分子被称为CD44变体(CD44v)。到目前为止已知有几十个CD44同种型。

CD44s，其不包含任何变体外显子，是最普遍存在的形式，并被大多数类型的细胞表达[Ponta, H.等人Nat Rev Mol Cell Biol. 2003 Jan; 4(1): 33-45]。CD44变体蛋白，其中包含10个变体外显子的一个或多个，大多数被报道与癌症，和自身免疫性疾病例如类风湿性关节炎和多发性硬化有关[见例如Naor等 Adv. Cancer Res., 71, 241-319,1997；和Naor等 Critical Reviews in Clinical Laboratory Sciences. 39, 527-579,2002]。

患有类风湿性关节炎(RA)的患者的关节炎性细胞显示一个称为CD44vRA的选择性剪接CD44变体的序列。人CD44vRA含有与角化细胞CD44v3-v10同种型的序列相同的序列，其中在变体外显子4和变体外显子5之间的剪接接合处加入额外的丙氨酸，其不干扰阅读框。患有胶原诱导的关节炎(CIA)的小鼠在相同的位点含有也包括丙氨酸的类似的序列。CD44vRA序列在RA患者和银屑病关节炎(PA)患者的关节炎性滑膜细胞上表达，但既不在健康供体的角化细胞也不在外周血白细胞(PBLs)上表达。此外，虽然RA患者的关节炎性细胞表达CD44vRA，但得自同一患者的PBLs和得自骨关节炎患者的滑膜液细胞几乎不能表达这种变体，表明这种同种型的排他性(Nedvetzki等, J Clin Invest 111: 1211-1220,2003; Golan等, J Autoimm 28: 99-113, 2007)。