[发明专利]多剂量注射用树突状细胞疫苗的制备及用于阻断HER2和HER3的联合治疗

权利要求书

1.一种产生可注射的多剂量的抗原脉冲的树突状细胞疫苗的方法，所述方法包括：

将至少一种抗原与树突状细胞(DC)接触；

用至少一种TLR激动剂激活所述树突状细胞；

以多剂量的形式冷冻保存所述树突状细胞，其中所述多剂量包括初始免疫剂量和多个加强剂量；

其中当解冻所述树突状细胞时，所述树突状细胞产生有效量的至少一种细胞因子以产生T细胞应答。

2.根据权利要求1所述的方法，进一步包括解冻所述树突状细胞，其中所述树突状细胞产生有效量的至少一种细胞因子以产生T细胞应答。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述抗原是肿瘤抗原。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述抗原是病毒抗原。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述TLR激动剂是LPS。

6.根据权利要求1所述的方法，包括使用IFN-γ激活所述树突状细胞。

7.根据权利要求1所述的方法，其中所述冷冻保存包括在包含约55％的勃脉力，约40％人血清白蛋白，和约5％DMSO的冷冻培养基中冷冻所述树突状细胞。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述冷冻保存包括在约-70℃或更低的温度下冷冻所述树突状细胞。

9.根据权利要求1所述的方法，其中解冻后所述树突状细胞的复苏和生活力大于或等于约70％。

10.根据权利要求1所述的方法，其中解冻后所述树突状细胞的复苏和生活力大于或等于约80％。

11.根据权利要求1所述的方法，其中冷冻保存所述树突状细胞至少约1周。

12.根据权利要求1所述的方法，其中所述细胞因子是IL-12。

13.根据权利要求1所述的方法，其中通过所述树突状细胞能够裂解靶细胞，所述树突状细胞展示出杀伤功能。

14.一种用于激发哺乳动物内的免疫应答的冷冻保存的可注射的多剂量的抗原脉冲的树突状细胞疫苗，所述可注射的多剂量的抗原脉冲的树突状细胞疫苗包括：

加载有至少一种抗原的树突状细胞；

其中所述树突状细胞通过暴露于至少一种TLR激动剂而被激活；和

其中所述树突状细胞产生有效量的至少一种细胞因子以产生T细胞应答。

15.根据权利要求14所述的可注射的多剂量的抗原脉冲的树突状细胞疫苗，其中所述抗原是肿瘤抗原。

16.根据权利要求14所述的可注射的多剂量的抗原脉冲的树突状细胞疫苗，其中所述抗原是病毒抗原。

17.根据权利要求14所述的可注射的多剂量的抗原脉冲的树突状细胞疫苗，其中所述TLR激动剂是LPS。

18.根据权利要求14所述的可注射的多剂量的抗原脉冲的树突状细胞疫苗，其中所述树突状细胞通过暴露于IFN-γ而被激活。

19.根据权利要求14所述的可注射的多剂量的抗原脉冲的树突状细胞疫苗，其中所述疫苗已经在约-70℃或更低的温度下在包含约55％的勃脉力，约40％的人血清白蛋白和约5％DMSO的冷冻培养基中冷冻保存。

20.根据权利要求14所述的可注射的多剂量的抗原脉冲的树突状细胞疫苗，其中解冻后所述树突状细胞的复苏和生活力大于或等于约70％。

21.根据权利要求14所述的可注射的多剂量的抗原脉冲的树突状细胞疫苗，其中解冻后所述树突状细胞的复苏和生活力大于或等于约80％。

22.根据权利要求14所述的可注射的多剂量的抗原脉冲的树突状细胞疫苗，其中所述组合物冷冻保存至少约一周。

23.根据权利要求14所述的可注射的多剂量的抗原脉冲的树突状细胞疫苗，其中所述细胞因子是IL-12。

24.一种在哺乳动物中激发免疫应答的方法，包括向有此需要的哺乳动物施用权利要求14所述的冷冻保存的可注射的多剂量的抗原脉冲的树突状细胞疫苗的剂量。