[发明专利]作为真菌感染疫苗的真菌葡萄糖神经酰胺

说明书

技术领域

本发明涉及抗原真菌葡萄糖神经酰胺，包括该葡萄糖神经酰胺的组合物(例如，能用于治疗或预防真菌性疾病的疫苗)，以及制备和使用该组合物的方法。

背景技术

真菌感染对公共健康造成严重威胁。真菌常见于环境中，因为它们能在土壤、植物和树木、固有表面和生物体(包括人的皮肤)上生长。尽管有抗真菌药物，但是，侵袭性真菌感染的发病率和死亡率依然很高，特别是在危重患者中。关于综述，参见Enoch等(J.Medicinal Microbiol.55：809-818，2006)和Spellberg(Medicine Reports 3∶13，2011)。预防性或治疗性免疫然后成功清除真菌病原在很大程度上取决于宿主免疫系统在免疫应答中被适当激活的能力以及引发不明显损害健康组织的有效应答的能力。存在开发以及改进真菌疫苗的需要。

发明内容

本发明部分地基于我们的研究，该研究表明施用从非致病性真菌纯化的葡萄糖神经酰胺可抵御致病性真菌。更具体地，我们的研究显示，腹腔施用从非致病性真菌产朊假丝酵母(Candida utilis)(圆酵母)纯化的葡萄糖神经酰胺明显降低了新型隐球菌在小鼠中从肺部向脑部的扩散，从而预防致命性脑膜脑炎的发生。本发明的组合物不仅诱导主动免疫，还利用脂质抗原诱导主动免疫。相反，大多数疫苗是由蛋白质或肽组成的。因为抗原的来源可以是非致病性真菌，我们预计本申请所公开的治疗方法将可抵御许多而且可能抵御全部致病性真菌。于是，在第一方面，本发明的特征在于包括从非致病性真菌(例如，产朊假丝酵母)纯化的真菌葡萄糖神经酰胺(GlcCer)和佐剂(例如，2-羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)，完全弗氏佐剂或不完全弗氏佐剂)的组合物。

在第二方面，本发明特征在于通过对患者施用包括真菌葡萄糖神经酰胺(例如，从非致病性真菌分离的真菌葡萄糖神经酰胺)的组合物治疗具有真菌性疾病的患者的方法。我们预计可以治疗广泛的真菌性疾病，包括由犁头霉属(Absidia)、链格孢属(Alternaria)、曲霉属(Asper gillus)、蛙粪霉菌属(Basidiobolus)、双极霉属(Bipolaris)、念球菌属(Candida)、枝孢霉属(Cladosporium)、隐球菌属(Cryptococcus)、弯孢霉属(Curvularia)、表皮癣菌属(Epidermophyton)、克雷伯菌属(Klebsiella)、小孢子菌属(Microsporum)、青霉菌属(Penicillium)、肺孢子虫属(Pneumocystis)、红酵母属(Rhodotorula)、酵母菌属(Saccharomyces)、葡萄状穗霉属(Stachybotrys)、毛癣菌属(Trichophyton)、毛孢子菌属(Trichosporon)或者万吉拉菌属(Wangiella)的真菌感染导致的疾病。可以纯化GlcCer的非致病性真菌可以是例如产朊假丝酵母。组合物可以以治疗有效量施用，治疗有效量是将真菌性疾病的迹象或症状减轻至患者感到缓解且优选完全缓解的程度的量。组合物可以每天施用直至患者被成功治疗。组合物可以配制为用于局部施用或通过注射(例如，皮下或肌内注射)施用。

在第三方面，本发明特征在于通过向受试者施用包括真菌葡萄糖神经酰胺(例如，从非致病性真菌分离的真菌葡萄糖神经酰胺)的组合物而预防受试者真菌性疾病的方法。与治疗方法一样，预防方法可以用于预防由犁头霉属、链格孢属、曲霉属、蛙粪霉菌属、双极霉属、念球菌属、枝孢霉属、隐球菌属、弯孢霉属、表皮癣菌属、克雷伯菌属、小孢子菌属、青霉菌属、肺孢子虫属、红酵母属、酵母菌属、葡萄状穗霉属、毛癣菌属、毛孢子菌属或者万吉拉菌属的真菌感染导致的疾病。纯化GlcCer的非致病性真菌可以是产朊假丝酵母。如本申请所述以及疫苗疗法领域所已知的，除了明确的GlcCer抗原，组合物可以进一步包括佐剂。施用组合物的步骤可以发生至少两次，第一次作为初次接种，第二次(以及后续次数)作为加强免疫。与治疗方法一样，被施用用于预防的组合物可以配制为用于局部施用或通过注射(例如，皮下或肌内注射)施用。

在第四方面，本发明特征在于配制真菌性疫苗的方法，通过：(a)提供从非致病性真菌分离的真菌葡萄糖神经酰胺；以及(b)在生理上可接受的辅料中将真菌葡萄糖神经酰胺与佐剂混合。

对于“大约”，我们指的是加减所提及值的10％以内。例如，大约10mg指的是9～11mg。

对于“抗原”或“免疫原”，我们指的是对受试者(例如，人类)施用后诱导抗体产生的物质。